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細(xì)胞培養(yǎng)板的選擇

時間:2012-1-12閱讀:201
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細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?/p>

 

(1)平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

不同形狀的培養(yǎng)板有不同用途。培養(yǎng)細(xì)胞,通常是選用平底的,這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對一致。因此做MTT等實驗時,無論是貼壁和懸浮細(xì)胞,一般選用平底板。測吸光值一定要使用平底的培養(yǎng)板。要特別注意材質(zhì), 標(biāo)示“Tissue Culture (TC) Treated”是養(yǎng)細(xì)胞用的。

U型或V型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細(xì)胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸刺激,這時一般會選用U型板,因為細(xì)胞會由于重力的作用而聚集在很小的范圍內(nèi)內(nèi)。圓底培養(yǎng)板還會用于同位素?fù)饺氲膶嶒?,需要用?xì)胞收集儀收集細(xì)胞的培養(yǎng),如“混合淋巴細(xì)胞培養(yǎng)”等。V型板常用做細(xì)胞殺傷、免疫學(xué)血凝集實驗。細(xì)胞殺傷這種實驗也可用U型板替代(加入細(xì)胞后,低速離心)。

 

(2)Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板的區(qū)別

Terasaki plate主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有兩種sitting 和handing drop兩種方法,兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同。材料上選擇crystal class polymer ,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。

細(xì)胞培養(yǎng)板主要是PS材料,材料是treated sufface,便于細(xì)胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還有浮游細(xì)胞的生長材料,同時還有l(wèi)ow binding surface

 

(3)細(xì)胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別

酶標(biāo)板一般要比細(xì)胞培養(yǎng)板貴,細(xì)胞板主要做細(xì)胞培養(yǎng),也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不用做細(xì)胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,需要更高的要求和特定的酶標(biāo)工作液。

 

(4)常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在2~3mm范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量(參考下表)。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細(xì)胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

常用的培養(yǎng)器皿

培養(yǎng)器皿
底面積(cm2)
加培養(yǎng)液量(mL)
可獲細(xì)胞量

96孔培養(yǎng)板
0.32
0.1
105

24孔培養(yǎng)板
2
1.0
5×105

12孔培養(yǎng)板
4.5
2.0
106

6孔培養(yǎng)板
9.6
2.5
2.5×106

4孔培養(yǎng)板
28
5.0
7×106

3.5cm培養(yǎng)皿
8
3.0
2.0×106

6cm培養(yǎng)皿
21
5.0
5.2×106

9cm培養(yǎng)皿
49
10.0
12.2×106

10cm培養(yǎng)皿
55
10.0
13.7×106

25cm塑料培養(yǎng)瓶
25
5.0
5×106

75cm塑料培養(yǎng)瓶
75
15~30
2×107

25cm玻璃培養(yǎng)瓶
19
4.0
3×106

100cm玻璃培養(yǎng)瓶
37.5
10.0
6×106

250cm玻璃培養(yǎng)瓶
78
15.0
2×107

2500cm旋轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶
700
100~250
2.5×108
 

注:各種單層生長的細(xì)胞在培養(yǎng)皿中長滿的細(xì)胞數(shù),主要取決于器皿底表面積和細(xì)胞體積的大小。上表以Hela細(xì)胞為例給出的可獲細(xì)胞量僅作參考。
 

 

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