用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的REG-4抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（ 值），計(jì)算樣品濃度。

1、 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4 過夜后于1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20或-80 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2、 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于 1000 g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨?/span>置于-20 或-80 保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3、 其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000 g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?/span>-20 或-80 保    存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

1、 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?nbsp;100 ，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100 ，注意不要有氣泡，加樣 時(shí)將樣品加于酶標(biāo)板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37溫育2小時(shí)。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效

用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的REG-4抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長測(cè)定吸光度（ 值），計(jì)算樣品濃度

說明

1、  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，

    本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

2、  zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必

準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3、 只有全部使用試劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守試劑的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。

4、 在儲(chǔ)存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的   污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、 試劑盒保存：請(qǐng)收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請(qǐng)置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正?，F(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

8、 有效期：6個(gè)月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。

2、 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加

用純化的REG-4抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的REG-4抗體、HRP標(biāo)記的親和素，經(jīng)過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的REG-4呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測(cè)定吸光度（ 值），計(jì)算樣品濃度。

1、  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，

    本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

2、  zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必

準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3、 只有全部使用劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守試劑的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。

4、 在儲(chǔ)存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的   污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、 試劑盒保存：請(qǐng)收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請(qǐng)置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

8、 有效期：6個(gè)月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。

 100 （臨用前配制），酶標(biāo)板加上覆膜，37 溫育1小時(shí)。

3、 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板 3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400 /每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4、 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（臨用前配制）100 ，加上覆膜，37 溫育1小時(shí)。

5、 棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，方法同步驟3。

6、 每孔加底物溶液90 ，酶標(biāo)板加上覆膜37 避光顯色（反應(yīng)時(shí)間控制在15-30分鐘，當(dāng)標(biāo)準(zhǔn)孔的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯時(shí)，即可終止）。

7、 每孔加終止溶液50 ，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物    液的加入順序相同。

8、 立即用酶標(biāo)儀在450nm波長測(cè)量各孔的光密度（ 值）。

洗板方法

1、 手工洗板方法：將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘，吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體，在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。

2、 自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。

特異性

    本試劑盒可同時(shí)檢測(cè)重組或天然的人REG-4，且與其它相關(guān)蛋白無交叉反應(yīng)。

計(jì)算

  各標(biāo)準(zhǔn)品及樣本 值扣除空白孔 值后作圖（七點(diǎn)圖），如設(shè)置復(fù)孔，則 應(yīng)取其平均值計(jì)算。以標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)）， 值為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），在對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線。推薦使用專業(yè)制作曲線軟件進(jìn)行分析，如 curve expert 1.3，根據(jù)樣品 值，由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度，乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與 值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的回歸方程式，將樣品的 值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。

檢測(cè)范圍：3.12 ng/ml - 200 ng/ml，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線請(qǐng)取用以下濃度值：200 ng/ml，100 ng/ml，50 ng/ml，25 ng/ml，12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.12 ng/ml。

zui低檢測(cè)限：0.78 ng/ml

說明

1、  由于現(xiàn)有條件及科學(xué)技術(shù)水平尚不能對(duì)所有供貨商提供的所有原料進(jìn)行全面的鑒定與分析，

    本產(chǎn)品可能存在一定的質(zhì)量技術(shù)風(fēng)險(xiǎn)。

2、  zui終的實(shí)驗(yàn)結(jié)果與試劑的有效性、實(shí)驗(yàn)者的相關(guān)操作以及當(dāng)時(shí)的實(shí)驗(yàn)環(huán)境密切相關(guān)，請(qǐng)務(wù)必

準(zhǔn)備充足的標(biāo)本備份。

3、 只有全部使用試劑才能保證檢測(cè)效果，因?yàn)樗性噭┒际怯嘘P(guān)聯(lián)的，不能混用其他制造商的產(chǎn)品。只有嚴(yán)格遵守試劑的實(shí)驗(yàn)說明才會(huì)得到的檢測(cè)結(jié)果。

4、 在儲(chǔ)存及溫育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和微生物的   污染，因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、 試劑盒保存：請(qǐng)收到試劑盒后盡快將標(biāo)準(zhǔn)品、檢測(cè)溶液A和檢測(cè)溶液B保存于-20 ，其余試劑短期保存請(qǐng)置于4 ，長期保存則置于-20 。開封后的酶標(biāo)板要密封加干燥劑后保存于-20 ，避免潮濕。

6、 濃洗滌液會(huì)有鹽析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。

7、 剛開啟的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成任何影響。

8、 有效期：6個(gè)月。

9、 本操作說明適用于48T試劑盒，但48T試劑盒所有試劑減半。