丙二醛（MDA）酶聯(lián)免疫方法實(shí)驗(yàn)原理

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中丙二醛（MDA）水平。用純化的丙二醛（MDA）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入丙二醛（MDA），再與HRP標(biāo)記的丙二醛（MDA）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的丙二醛（MDA）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中丙二醛（MDA）濃度。 

試劑盒組成 

1

30倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

6ml×1瓶

2

酶標(biāo)試劑

6ml×1瓶

8

標(biāo)準(zhǔn)品（40nmol/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標(biāo)包被板

12孔×8條

9

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

6ml×1瓶

10

說(shuō)明書(shū)

1份

5

顯色劑A液

6ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

6ml×1/瓶

12

密封袋

1個(gè)

標(biāo)本要求 

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

丙二醛（MDA）酶聯(lián)免疫方法操作步驟

標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

20nmol/L

5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

10nmol/L

4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

5nmol/L

3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

2.5nmol/L

2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.25nmol/L

1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品

150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。 
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)）。

測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

抗釀酒酵母抗體(ASCA)ELISA試劑盒 ，英文名： Anti-Saccharomyces cerevisiae antibody,ASCA ELISA Kit ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ASCA ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
雄烯二酮(ASD)ELISA試劑盒 ，英文名： Androstenedione ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ASD ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
促?；鞍?ASP)ELISA試劑盒 ，英文名： Acylation Stimulating Protein ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ASP ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗凝血酶(AT)ELISA試劑盒 ，英文名： Anti-trypsin ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： AT ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
血管緊張素II受體抗體(AT II RI Ab)ELISA試劑盒 ，英文名： angiotension II receptor Antibody ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： AT II RI Ab ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
血管緊張素Ⅱ受體2(AT2R)ELISA試劑盒 ，英文名： Angiotensin Ⅱ Receptor 2 ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： AT2R ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒 ，英文名： anti-trophoblast antibody ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATA ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
血管緊張肽酶A(ATA)ELISA試劑盒 ，英文名： Angiotensinase A ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATA ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗胸腺細(xì)胞球蛋白(ATG)ELISA試劑盒 ，英文名： anti-thymocyte globulin ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATG ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)ELISA試劑盒 ，英文名： anti-thyroid-globulin antibody ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATGA/TGAB ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒 ，英文名： Anti-Thrombin III ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： AT-III ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗甲狀腺微粒體抗體(ATMA/TMAB)ELISA試劑盒 ，英文名： Anti-thyriod microsome antibody ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATMA/TMAB ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)
抗凝血酶受體(ATR)ELISA試劑盒 ，英文名： anti-thrombin receptor ，產(chǎn)品縮寫(xiě)： ATR ，規(guī)格： 48/96Tests ，包裝： 1box(液體盒裝) ，重量： 500g(48T)、860g(96T)