ELISA試劑盒研究方法

時間：2014/5/22閱讀：930

近年來，酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒試劑盒國家科技迅猛發(fā)展，取的了可喜的成績，過去有很長一段時間有人用電泳證明血清中抗體活性在γ球蛋白部分，故曾把抗體統(tǒng)稱為兩種（γ）球蛋白。后來發(fā)現(xiàn)，抗體并不都在γ區(qū)；并且位于γ區(qū)的球蛋白，也不一定都具有抗體活性。ELISA試劑盒以含鐵的磁性微粒作為ELISA試劑盒固相載體，反應(yīng)后用磁鐵的吸引進行分離，洗滌利便，ELISA試劑盒一般均配以特殊儀器。為比較不同固相在某一ELISA試劑盒測定中的優(yōu)劣，可應(yīng)用如下的試驗：用其他免疫學(xué)測定方法選出一個典型的陽性標(biāo)本和陰性標(biāo)本，將它們進行一系列稀釋后，在不同的固相載體上按預(yù)定的ELISA試劑盒操縱步驟進行測定，然后比較結(jié)果。

在ELISA試劑盒中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:

1.固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板

2.包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。

3.酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA試劑盒法進行初步效價的滴定。

4.酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。

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