ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。雖然ELISA試劑盒的操作步驟看似簡(jiǎn)單易操作,但如果我們?cè)趯?shí)驗(yàn)的時(shí)候細(xì)節(jié)沒(méi)做到位的話(huà)就會(huì)直接影響實(shí)驗(yàn)的效果。
做ELISA實(shí)驗(yàn)容易,想要做好ELISA實(shí)驗(yàn)還是有點(diǎn)難度的!求助,做ELISA實(shí)驗(yàn)老是失敗怎么辦?今天紀(jì)寧生物為大家總結(jié)ELISA實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn),讓大家避免掉入“坑"里,以后的ELISA實(shí)驗(yàn)必定是一路綠燈!
一、ELISA試劑盒操作指南:
固相包被→加待測(cè)樣品→溫育→洗滌+加酶標(biāo)物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結(jié)果。
1.試劑盒平衡:試劑盒中所有試劑和板條均應(yīng)在試驗(yàn)前平衡至室溫(約25℃),一般需在室溫放置20~30分鐘以上。平衡時(shí)間太短會(huì)造成試劑混勻不夠,樣品孵育時(shí)間相對(duì)縮短,ELISA反應(yīng)不夠充分。冬季室溫低,可將試劑盒置37℃溫箱20分鐘。
2.樣品和試劑的混勻:稀釋前、后的樣品必須充分混勻,所有試劑在加樣前也須搖勻,以保證試驗(yàn)的均一性。
二、ELISA實(shí)驗(yàn)成功七要素:
①成功采集到樣品
②樣品保存妥當(dāng)
③成功復(fù)溫樣品,確保沒(méi)有降解
④試劑盒質(zhì)量沒(méi)問(wèn)題
⑤成功做出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
⑥操作過(guò)程沒(méi)有出現(xiàn)差錯(cuò),編號(hào)沒(méi)有混亂
⑦顯色之后顏色明顯,且在檢測(cè)范圍之內(nèi)
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