大部分ELISA試劑盒檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集,應(yīng)注意避免溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP 為標(biāo)記的ELISA試劑盒測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。
1. 根據(jù)不同的檢驗(yàn)?zāi)康倪x擇標(biāo)本容器。采集的方法需正確:
抽血清標(biāo)本需要干燥注射器、針頭和干燥試管;采全血標(biāo)本時(shí)需注意抗凝;采集血培養(yǎng)標(biāo)本時(shí)應(yīng)防止污染,除嚴(yán)格執(zhí)行無(wú)菌操作外,抽血前應(yīng)檢查培養(yǎng)基是否符合要求,瓶塞是否干燥,培養(yǎng)液不宜太少。
2. 同時(shí)需要抽取幾個(gè)項(xiàng)的血標(biāo)本,應(yīng)先注入血培養(yǎng)瓶,再注入抗凝管,后注入干燥試管,動(dòng)作需迅速準(zhǔn)確
3. 嚴(yán)禁在輸液、輸血的針頭出抽取血標(biāo)本,以免影響檢驗(yàn)結(jié)果,應(yīng)在對(duì)側(cè)肢體采取。
血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如有細(xì)菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。一般說(shuō)來(lái),在5 天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG 聚合,使間接法的試劑本底加深。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,ELISA試劑盒應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。
混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存。保存血清自采集時(shí)就應(yīng)注意無(wú)菌操作,也可加入適當(dāng)防腐劑??鼓?的標(biāo)本因纖維蛋白原的干擾而造成假陽(yáng)性,建議盡量不用抗凝血尤其是肝素抗凝劑。