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ELISA試劑盒實驗過程必知小知識:
① 建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
② 若顯色過淺,可適當延長底物溫育時。
③ 實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
④ 酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
⑤ 標本宜在新鮮時檢測,如有細菌污染,菌體中可能含有內(nèi)源性HRP,也會產(chǎn)生假陽性反應,保存過久可發(fā)生聚合在ELISA中可使本底加深。
⑥ 凍結標本溶解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛混合,不要在混勻器上強烈震蕩。
⑦ 渾濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。
⑧ 反復凍融會使蛋白效價降低,所以代測樣本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。
ELISA試劑盒的質(zhì)量操控方法:
1、規(guī)則操控目標的標準(預期值)。
2、確定操控的目標。
3、丈量實踐數(shù)據(jù)。
4、對比或較對實踐數(shù)據(jù)與預期值之間的區(qū)別,并說明發(fā)生這一區(qū)別的因素,超出預訂差錯規(guī)模,報警系宣布信號,反響通道中止。
5、制定或挑選操控辦法和手法。
6、采納舉動,處理區(qū)別,恢復原狀(原標準狀態(tài))的手法發(fā)揮作用。
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