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影響凍存細(xì)胞活性的因素

時間：2018/11/27閱讀：1421
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做試驗(yàn)前要先學(xué)會凍存，以備自己在后面的試驗(yàn)中能堅持同一來源、穩(wěn)定牢靠的細(xì)胞，且可減少污染或其它不利影響。你們細(xì)胞是怎樣凍存的?求解!!!我的是4度冰箱放半小時,-20度冰箱半小時,然后轉(zhuǎn)移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1個月后,細(xì)胞復(fù)蘇就感覺狀態(tài)不太好了!!

影響凍存細(xì)胞活性的因素
1，細(xì)胞凍存保護(hù)劑：常用的有二甲基亞砜（DMSO）和甘油，常用的濃度為5%-10%（90%小牛血清）。DMSO對二倍體細(xì)胞的毒性較甘油小。
2，細(xì)胞懸液的凍住速度：慢凍時冰凍在細(xì)胞外形成，因此不致危害細(xì)胞。多數(shù)細(xì)胞以每分鐘下降1℃的速度，降至-20℃凍住。均可取得滿足效果。
3，保存溫度：液氮罐，可到達(dá)-196℃，此刻所有的物理化學(xué)活動均降至zui低限度，以確保細(xì)胞長時間保存。
4，復(fù)蘇：急速消融復(fù)蘇可防止危害細(xì)胞。凍住細(xì)胞從液氮中取出后，應(yīng)立即放入37℃~43℃的水浴中，30秒至一分鐘內(nèi)消融。

 

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