無論是水浴仍是濕盒溫育，反應(yīng)板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能活絡(luò)平衡。室溫溫育的反應(yīng)，操作時(shí)的室溫應(yīng)嚴(yán)峻捆綁在規(guī)矩的范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時(shí)可根據(jù)說明書的要求操控溫育。室溫溫育時(shí)，ELISA試劑盒只需平置于操作臺(tái)上即可。應(yīng)留心溫育的溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)矩力求準(zhǔn)確。為保證這一點(diǎn)，一個(gè)人操作時(shí)，一次不宜多于兩塊板一同測(cè)
定。
ELISA試劑盒總需求時(shí)間來保溫，是因?yàn)镋LISA屬固相免疫測(cè)定，抗原、抗體的結(jié)合只在固相表面上發(fā)生。以抗體包被的夾心法為例，參與板孔中的標(biāo)本，其間的抗原并不是都有對(duì)等的和固相抗結(jié)合的時(shí)機(jī)，只需zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個(gè)逐步平衡的進(jìn)程，因而需經(jīng)松懈才華抵達(dá)反應(yīng)的完畢。

在ELISA試劑盒中一般有兩次抗原抗體反應(yīng)，即加標(biāo)本和加酶結(jié)合物后?？乖贵w反應(yīng)的完畢需求有必定的溫度和時(shí)間，這一保溫進(jìn)程稱為溫育，有人稱之為孵育，在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。

保溫的辦法除有的ELISA試劑盒儀器附有特制的電熱塊外，一般均選用水浴，可將ELISA試劑盒板置于水浴箱中，ELISA板底應(yīng)貼著水面，使溫度活絡(luò)平衡。為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時(shí)可讓反應(yīng)板漂浮在水面上。若用保溫箱，ELISA試劑盒應(yīng)放在濕盒內(nèi)，濕盒要選用傳熱性超卓的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，zui終將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應(yīng)先放在保溫箱中預(yù)溫至規(guī)矩的溫度，特別是在氣溫較低的時(shí)分更應(yīng)如此。