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可以使用ELISA試劑盒試驗(yàn)的樣本品種很多,有血清,血漿,細(xì)胞上清,細(xì)胞裂解液,尿液,關(guān)節(jié)滑液,腦脊液,肺泡灌洗液,各種安排的安排勻漿;收集和處理的辦法都不相同。下面就列出了搜集的給類樣本的收集、處理和保存辦法。辦法大多出自文獻(xiàn)和試劑盒說明書,部分辦法經(jīng)驗(yàn)證過,但有的辦法并沒有實(shí)際操作過,所以,以下辦法僅供參考。
ELISA試劑盒試驗(yàn)中血清的收集、處理和保存;
1、 真空采血針收集2ml新鮮血液,參加無菌試管中;
2、 采血后室溫靜置1小時(shí);
3、 將收集血液用離心機(jī)4℃,2500rpm離心10min,,將離心好的勻漿留上清,棄下面沉積。
4、 取上清。 分裝凍存?zhèn)溆茫?br />2-8℃下,可放置保存24-48小時(shí);
-20℃下,可放置保存1個(gè)月;
-70℃下,可放置保存6個(gè)月;
5、 根據(jù)你的試驗(yàn)需求,取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。
大部分ELISA檢測(cè)試劑盒均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按慣例辦法收集,應(yīng)留意防止溶血,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)添加非特異性顯色。此外還應(yīng)防止細(xì)菌污染,由于菌體中可能含有含有內(nèi)源性HRP,也會(huì)產(chǎn)生假陽性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮 時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過久,其間的可發(fā)作聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。
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