ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床上得到了廣泛的運(yùn)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的查看效果影響較大，如不留心，有或許致使顯色不全、花板等效果。我將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問(wèn)題的要素及解決辦法總結(jié)于下，以期給同行帶來(lái)一些啟示，前進(jìn)試驗(yàn)質(zhì)量。下面剖析ELISA試驗(yàn)的要素，并給出相應(yīng)的解決辦法。
一、 孵育
或許要素：
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋，使標(biāo)本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*； 2) 孵育時(shí)間人為延伸，致使非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍，難以清洗*。
解決辦法：
1) 貼封片或加蓋； 2) 按說(shuō)明進(jìn)程嚴(yán)峻操控操作時(shí)間。
二、洗板
或許要素：
a 選用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。
b 選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí)，洗液量缺少，致使洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，致使洗板效果差。
c 反響板過(guò)多構(gòu)成洗板等候時(shí)間長(zhǎng)。
解決辦法：
a 確保洗液注滿各孔，洗板針暢通，ELISA試劑盒洗完板后在吸水紙（選擇潔凈、無(wú)或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
b 合理安排，或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
三、選擇試劑
選擇質(zhì)量的查看試劑，嚴(yán)峻依照試劑說(shuō)明書進(jìn)行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
四、加樣
或許要素：
a血清或血漿標(biāo)本別離欠好即進(jìn)行加樣； 
b手工操作中，加樣板過(guò)多構(gòu)成加樣后放入孵箱前等候時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))； 
c加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。
解決辦法：
a 標(biāo)本為血清：將血液先天然寄存1-2小時(shí)后，再用3000rmp離心15分鐘；標(biāo)本為血漿：有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管，采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次，放置一段時(shí)間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內(nèi)查看，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，ELISA試劑盒則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
b 加樣后及時(shí)放入孵箱。
c加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。 
d 假設(shè)選用AT或其他全自動(dòng)加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
e 標(biāo)本較多時(shí)，請(qǐng)分批操作。