ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在臨床上得到了廣泛的運用，但操作中的各個環(huán)節(jié)對試驗的檢測效果影響較大，如不留心，有可能導致顯色不全、花板等效果。我將操作中各個環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結于下，以期給同行帶來一些啟示，前進試驗質量。

下面分析elisa試劑盒試驗操作中可能影響效果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑選擇質量優(yōu)異的檢測試劑，嚴峻按照試劑闡明書進行操作，操作前將elisa試劑盒在室溫下平衡30-60分鐘。

2 加樣可能原因：1）血清或血漿標本分別欠好即進行加樣；2）手工操作中，加樣板過多構成加樣后放入孵箱前等候時間過長；3）加完標本再加酶試劑時酶濺起孔外。解決辦法：1）標本為血清：將血液先天然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：有必要運用含抗凝劑的血液標本搜集管，采血后有必要當即倒置采血管混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。2)加樣后及時放入孵箱。3)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。4)如果選用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。5)標本較多時，請分批操作。

3 孵育可能原因：1)孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸騰，吸附于孔壁，難于清洗*；2)孵育時間人為延伸，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：1)貼封片或加蓋；2)按闡明進程嚴峻控制操作時間。

4 洗板可能原因：1)選用手工洗板，孔與孔之間液體交叉。2)選用半自動洗板機洗板時，洗液量缺少，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。3)反應板過多構成洗板等候時間長。解決辦法：1)保證洗液注滿各孔，洗板針疏通，洗完板后在吸水紙上輕輕拍干；2)合理安排，或多用幾臺洗板機。

5 顯色可能原因：1顯色劑制造后放置時間過長或運用過期顯色劑；2)加顯色劑時濺起孔外構成液體回流。解決辦法：1)顯色劑盡量在臨用前制造，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用；2)加樣時堅持顯色劑不外流；3)A、B液應避免接觸金屬器械。

6 中止可能原因如加中止液時發(fā)作較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加中止液時應避免發(fā)作氣泡。

7 讀板如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。

所以在整個操作進程中保證酶標板不接觸次氯酸;盡可能完結ELISA檢測標準自動化，有用前進檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)異elisa試劑盒外，有必要嚴峻按照操作進程進行操作，一同作好室內質控、室間質評，以慎重的工作作風檢測每一份標本，才華保證檢測質量?，F(xiàn)在國內已有恰當數(shù)量的單位具有全自動酶標儀，這關于完結ELISA標準化檢測、前進檢測質量起到了重要效果。