作為專業(yè)的生物試劑供貨商，我司擁有豐厚的商品經(jīng)驗(yàn)，這篇文章小編就給咱們介紹下酶聯(lián)免疫試劑盒的原理及注意事項(xiàng)。
ELISA試劑盒基本原理
ELISA試劑盒辦法的基本原理是酶分子與抗體或抗抗體分子共價(jià)，此種不會(huì)改動(dòng)抗體的免疫學(xué)特性，也不影響酶的生物學(xué)活性。此種酶標(biāo)記抗體可與吸附在固相載體上的抗原或抗體發(fā)作特異性。滴加底物溶液后，底物可在酶效果下使其所含的供氫體由無色的還原型變成有色的氧化型，呈現(xiàn)色彩反響。因此，可通過底物的色彩反響來斷定有無相應(yīng)的免疫反響，色彩反響的深淺與標(biāo)本中相應(yīng)抗體或抗原的量呈正比。此種顯色反響可通過酶聯(lián)免疫試劑盒檢查儀進(jìn)行定量測(cè)定，這么就將酶化學(xué)反響的靈敏性和抗原抗體反響的特異性起來，使ELISA(酶聯(lián)免疫試劑盒)辦法變成一種既特異又靈敏的檢查辦法。
ELISA試劑盒在操作過程的影響因素如下：
1、ELISA試劑盒操作前應(yīng)對(duì)試驗(yàn)的物理參數(shù)有充沛的了解，如環(huán)境溫度(保持在18C～25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等，要先檢查水育箱溫度，是否符合要求。
2、ELISA試劑盒要確保加液量共同咱們?cè)谶\(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好，滴瓶不易控制加液量禁絕，形成顯色不共同，判別過錯(cuò)。
3、準(zhǔn)確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)筆直加入標(biāo)本或試劑，防止刮擦包被板底部。加樣過程中防止液體外濺，血清殘留在反響孔壁上，加樣器吸頭要清潔潔凈，防止污染，加樣次第要與說明書共同，否則可致使成果過錯(cuò)，試驗(yàn)重復(fù)性差。
4、ELISA試劑盒顯色液量不行過多加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下，加顯色系統(tǒng)后要避光反響，顯色液量不能過多，避免顯色過強(qiáng)。
5、手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大，洗刷次數(shù)不要超越說明書引薦的洗刷次數(shù)，洗液在反響孑L內(nèi)滯留的時(shí)刻不宜太長(zhǎng)。不要使洗液在孑L間竄流，形成孔問污染，致使假陰性或假陽性。
ELISA試劑盒的運(yùn)用注意事項(xiàng)具體如下：
1.ELISA試劑盒在制造規(guī)范品、檢查溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液制造，不能混雜。
2.濃洗刷液低溫保留會(huì)有鹽分出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶。
3.一次加樣時(shí)刻控制在分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，引薦運(yùn)用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的一同做規(guī)范曲線，做復(fù)孔。
5.ELISA試劑盒的洗刷過程非常重要，不充沛的洗刷易形成假陽性。
6.如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定，核算時(shí)請(qǐng)zui終乘以稀釋倍數(shù)。
7.剛敞開酶聯(lián)免疫試劑盒的酶聯(lián)板孔中可能會(huì)富含少量水樣物質(zhì)，此為正常景象，不會(huì)對(duì)試驗(yàn)成果形成任何影響。
8.ELISA試劑盒保留：未開封的試劑盒應(yīng)貯存于2-8℃;開封后的酶標(biāo)板應(yīng)與干燥劑一同貯存于鋁箔袋中置于2-8℃保留。僅在此出貯存條件下，商品在有效期內(nèi)可正常運(yùn)用。