抗生長(zhǎng)因子受體抗體的融合蛋白
將抗體的專一性結(jié)合能力和多功能的細(xì)胞因子的細(xì)胞毒性或毒素聯(lián)合起來(lái)的方法除了雙功能抗體外，用遺傳工程的方法得到的抗體融合蛋白也是一個(gè)有效的途徑。這種方法是將編碼毒素或細(xì)胞因子的基因和編碼單克隆抗體的基因融合起來(lái)，融合后的基因由細(xì)菌表達(dá)載體表達(dá)就可得到將單抗和細(xì)胞因子或毒素結(jié)合在一起的融合蛋白了。隨著重組DNA技術(shù)的進(jìn)展，這方面的 進(jìn)展也較快，現(xiàn)在已經(jīng)可以用單克隆抗體的一些單鏈片段作為識(shí)別區(qū)來(lái)?yè)饺胫亟M分子中了。很明顯，這種新的融合蛋白較傳統(tǒng)的將單抗和毒素用化學(xué)交聯(lián)方法結(jié)合的產(chǎn)物有著很大的*性。例如，由于抗體的單鏈融合蛋白比交聯(lián)分子小的多，因此，在大的腫瘤中，它們就有更強(qiáng)的穿透力。而且，融合蛋白也更容易生產(chǎn)和純化，在功能活性上也更穩(wěn)定和一致。
現(xiàn)在，對(duì)于過量表達(dá)EGF受體或HER－2的癌細(xì)胞，利用抗體－細(xì)胞因子或抗體－毒素的融合蛋白作為治療手段的研究正在進(jìn)行當(dāng)中。這些研究包括包含抗EGF受體的單抗和白細(xì)胞介素2或淋巴毒素的融合蛋白，包含抗HER－2的單抗和B7－2（CD80）的融合蛋白。這些蛋白都被發(fā)現(xiàn)可以將有活性的分子定位于癌癥發(fā)生位點(diǎn)，這種局部位點(diǎn)的活性分子的聚集足以激發(fā)相應(yīng)的免疫反應(yīng)從而導(dǎo)致腫瘤的減小。
例如，重組的免疫毒素scFv（225）－ETA和scFv（FRP5）－ETA分別包含了一個(gè)單鏈的抗EGF受體（225）和HER－2（FRP5）的單抗，并且融合了從假單胞菌中得來(lái)的外毒素（ETA）。scFv（225）－ETA可以專一性的抑制高水平表達(dá)了EGF受體的培養(yǎng)或異種移植的癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，同時(shí)，scFv（FRP5）－ETA也表現(xiàn)出了抑制高水平表達(dá)HER－2的癌細(xì)胞的生長(zhǎng)的活性。另外，由于有一些癌細(xì)胞會(huì)同時(shí)表達(dá)EGF受體和HER－2，而且這兩個(gè)受體在細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程中會(huì)有協(xié)同作用，因此，我們可以尋求一些其它的途徑來(lái)增強(qiáng)免疫毒素的作用?，F(xiàn)在已經(jīng)構(gòu)建和表達(dá)了雙價(jià)的scFv2（FRP5/225）－ETA和雙價(jià)的scFv（FRP5）－TGF－α－ETA等，這些新的免疫毒素是在原來(lái)的一個(gè)單抗和一個(gè)外毒素的基礎(chǔ)上，多融合了一個(gè)受體專一性的單抗識(shí)別區(qū)或者多融合了一個(gè)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α。這樣，由于這些新的免疫毒素有更強(qiáng)的定位作用或更強(qiáng)的毒性，因而對(duì)于癌細(xì)胞，特別是共表達(dá)兩種受體的癌細(xì)胞的治療效果比單價(jià)融合免疫毒素要 好很多。
在成膠質(zhì)細(xì)胞瘤及一些乳腺，卵巢，和肺的一些癌細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)的突變的EGF受體，EGFRvIII，相對(duì)于正常受體，它們的細(xì)胞外的區(qū)域有一些缺失。因此，根據(jù)這個(gè)特點(diǎn)，可以設(shè)計(jì)出包含針對(duì)EGFRvIII的專一性的scFv和假單胞菌的外毒素的重組免疫毒素，它對(duì)于表達(dá)EGFRvIII的鼠的成纖維細(xì)胞和轉(zhuǎn)入了EGFRvIII的成膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞都有專一性的毒性，但對(duì)于不表達(dá)這種突變受體的細(xì)胞卻沒有毒性。這無(wú)疑也是融合蛋白的重要應(yīng)用領(lǐng)域之一。
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