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閱讀:1190發(fā)布時(shí)間:2011-8-8
β葡萄糖醛酸苷酶是細(xì)胞溶酶體中的水解酶,在肝細(xì)胞中含量較高。測(cè)定β葡萄糖醛酸苷酶,有助于病情觀察和預(yù)后評(píng)價(jià)。
β葡萄糖醛酸苷酶臨床意義:
(1)血清β-葡萄糖醛酸苷酶(β-Glucuronidase)上升:病毒性或中毒性肝炎(伴有肝細(xì)胞壞死)、肝硬變及胰腺、乳腺、肝、結(jié)腸和子宮頸的惡性瘤。亦見于妊娠末三個(gè)月。
(2)血清β-Glucuronidase下降:嚴(yán)重肝衰竭及Ⅶ型粘多糖積累癥。
(3)尿中β-Glucuronidase上升:急性腎衰、腎及子宮頸或膀胱的癌癥、腎小球疾病、急性腎小管壞死,妊娠,泌尿系感染、尿道損傷、腎移植排斥反應(yīng)、腎結(jié)核、急性腎盂腎炎、血吸蟲病、系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)及從事苯胺生產(chǎn)的工人。
酶制劑的一般提取方法:
胞外酶可以直接進(jìn)行提取分離;胞內(nèi)游離存在的“離酶”以及與顆粒體(如細(xì)胞核、線粒體、微粒體、質(zhì)膜)結(jié)合的“結(jié)酶”都有一個(gè)破碎細(xì)胞過(guò)程,“結(jié)酶”還有一個(gè)轉(zhuǎn)變成水溶液的問(wèn)題。因此對(duì)酶類的提取要采用多種方法,常用的細(xì)胞破碎法如下:
a.機(jī)械法:如絞碎、刨碎、勻漿、研磨、擠壓或超聲波等。研磨時(shí)還可加入細(xì)砂、石英粉、氧化鋁等以利細(xì)胞破碎。
b.化學(xué)法:用鹽、堿、表面活性劑、EDTA、丙酮和正丁醇等可使細(xì)胞破碎、顆粒體結(jié)構(gòu)解體,從而把酶釋放出來(lái)。例如常將胰臟用數(shù)倍量丙酮處理2~3次,制成丙酮粉供多種酶的提取用;用膽酸鹽處理膜結(jié)構(gòu)上的脂蛋白和“結(jié)酶”,使兩者形成復(fù)合物,并帶上靜電荷,由于電荷之間的排斥作用,使膜破裂,達(dá)到溶解。
c.酶解法:用組織自溶或用*、脫氧核糖核酸酶、磷脂酶等降解細(xì)胞膜結(jié)構(gòu),然后再進(jìn)行提取。但應(yīng)知道組織自溶法對(duì)某些酶的提取是不利的,如胰蛋白是以酶原形式純化后再激活成*的,若用自溶法提取,酶原已轉(zhuǎn)成酶,純化就很困難。而用純的工具酶降解法是無(wú)此缺點(diǎn),但成本較高。
d.凍融法:采用反復(fù)冷凍與融化時(shí)由于細(xì)胞中形成了冰晶及剩余液體中鹽濃度的增高可以使細(xì)胞破裂。
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