人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）酶聯(lián)免疫供應(yīng)實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）水平。用純化的人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入Ⅲ型膠原（Col Ⅲ），再與HRP標(biāo)記的Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）濃度。
試劑盒組成
1
30倍濃縮洗滌液
20ml×1瓶
7
終止液
6ml×1瓶
2
酶標(biāo)試劑
6ml×1瓶
8
標(biāo)準(zhǔn)品（160ng/L）
0.5ml×1瓶
3
酶標(biāo)包被板
12孔×8條
9
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
1.5ml×1瓶
4
樣品稀釋液
6ml×1瓶
10
說(shuō)明書(shū)
1份
5
顯色劑A液
6ml×1瓶
11
封板膜
2張
6
顯色劑B液
6ml×1/瓶
12
密封袋
1個(gè)
人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）酶聯(lián)免疫供應(yīng)標(biāo)本要求
1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
80ng/L
5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
40ng/L
4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
20ng/L
3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
10ng/L
2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
5ng/L
1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
溫育：操作同3。
洗滌：操作同5。
顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
E-(Hu)（05）-02910 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C5b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02911 人補(bǔ)體片斷5b(C5b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C5b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02912 人補(bǔ)體片斷(C)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02913 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C4b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02914 人補(bǔ)體片斷4b(C4b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C4b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02915 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02916 人補(bǔ)體片斷3b(C3b)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3b ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02917 人補(bǔ)體片斷3a(C3a)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3a ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02918 人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3bR ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02919 人補(bǔ)體片段3b受體(C3bR)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3bR ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02920 人補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，人Ⅲ型膠原（Col Ⅲ）酶聯(lián)免疫供應(yīng)英文名： C4 ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02921 人補(bǔ)體蛋白3(C3)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C3 ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
E-(Hu)（05）-02922 人補(bǔ)體7(C7)ELISA檢測(cè)試劑盒 ，英文名： C7 ELISA Kit ，規(guī)格： 48T/96T
會(huì)員1.png)