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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司


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所在地區(qū):上海上海市

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技術(shù)文章

48T人基質(zhì)金屬蛋白酶-2

閱讀:337發(fā)布時(shí)間:2012-7-27

人基質(zhì)金屬蛋白酶-2

本試劑盒僅供研究使用      標(biāo)本:血清或血漿

二、注意事項(xiàng)
1.  此試劑為體外檢測(cè)試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號(hào)的試劑不能混用。
使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請(qǐng)于37℃孵育15分鐘
若24小時(shí)內(nèi)進(jìn)行實(shí)驗(yàn),標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時(shí)實(shí)驗(yàn),標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動(dòng)微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2~8℃,請(qǐng)勿冷凍,有效期請(qǐng)見(jiàn)盒內(nèi)標(biāo)示。

人基質(zhì)金屬蛋白酶-2

三、實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實(shí)驗(yàn)儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來(lái)稀釋樣品,按照1:100的體積比來(lái)稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

人基質(zhì)金屬蛋白酶-2

四、操 作 步 驟
1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代)
2、分別標(biāo)記樣品編號(hào),加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿(mǎn)應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個(gè)孔中加滿(mǎn)應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個(gè)孔中全部加滿(mǎn)應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。
10、每個(gè)孔中再次加滿(mǎn)洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
11、重復(fù)第5個(gè)步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
12、在每個(gè)孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個(gè)微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測(cè)定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。
16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn),計(jì)算樣本含量

人基質(zhì)金屬蛋白酶-2

五、結(jié) 果 判 斷
 1. 儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
 2、檢測(cè)值范圍:0-800pg/ml
 3、敏感度:5.0pg/ml

Dansyl chloride 丹磺酰氯 [605-65-2] 1g
Dansyl chloride 丹磺酰氯 [605-65-2] 5g
DAPI dihydrochloride 4’,6-二脒基-2-苯基吲哚二鹽酸鹽 [28718-90-3] 10mg
DEAE Dextran DEAE葡聚糖 [9064-91-9] 10g
DEAE Dextran DEAE葡聚糖 [9064-91-9] 50g
Decabromodiphenylethe r十溴聯(lián)苯醚、十溴二苯醚 [1163-19-5] 250g
Decanedioic acid 癸二酸 [111-20-6] 100g
Decanedioic acid 癸二酸 [111-20-6] 500g
Decanoic acid 癸酸 [334-48-5] 100g
1-Decanol 癸醇 [112-30-1] 500ml
Decyl-beta-D-glucopyranoside 癸基喃葡萄糖 [58846-77-8] 100mg
Decyl-beta-D-glucopyranoside 癸基喃葡萄糖 [58846-77-8] 1g
Decyltrimethylammonium bromide 十烷基*基* [2082-84-0] 100g
Defibrase 降纖酶 / 100U
Defibrase 降纖酶 / 1KU
Dehydroacetic acid 脫氫乙酸 [520-45-6] 10g
16-Dehydropregnenolone acetate 雙烯醇酮醋酸酯 [979-02-2] 25g
Denaturing solution DNA變性溶液 / 1L
2’-Deoxyadenosine, monohydrate 2’- 脫氧腺苷一水 [16373-93-6] 1g
2’-Deoxyadenosine, monohydrate 2’- 脫氧腺苷一水 [16373-93-6] 5g
(dADP)2'-Deoxyadenosine-5'-Diphosphate, trisodium salt 2’-脫氧腺苷5’二磷酸三鈉鹽 [72003-83-9] 50mg
dAMP 2’-Deoxyadenosine 5’-monophosphate, free acid 2’-脫氧腺苷 5-一磷酸 [653-63-4] 250mg
dATP 2'-Deoxyadenosine-5'-triphosphate, trisodium salt, trihydrate 5’-三磷酸-2’-脫氧腺苷三鈉鹽 三水 [1927-31-7] 50mg
Datp100mM solution dATP溶液 [1927-31-7] 0.25ml
Datp100mM solution dATP溶液 [1927-31-7] 0.5ml
Deoxy Big CHAP [86303-23-3] 250mg
Deoxycholic acid 脫氧膽酸 [83-44-3] 50g
Deoxycholic acid, sodium salt 脫氧膽酸鈉鹽 [302-95-4] 50g
2’, 7’-Dichlorofluorescein 2,7-二氯熒光素 [76-54-0] 5g
Deoxycholic acid, sodium salt 脫氧膽酸鈉鹽 [302-95-4] 250g
Deoxycholic acid, sodium salt 脫氧膽酸鈉鹽 [302-95-4] 10g
Deoxycorticosterone acetate 醋酸去氧皮質(zhì)酮 [56-47-3] 500mg
2’-Deoxycytidine hydrochloride 2’-脫氧胞苷鹽酸鹽 [3992-42-5] 1g


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