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研域(上海)化學試劑有限公司


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聯系人:楊經理 (經理)

技術文章

現貨人弓形蟲抗體IgGELISA 檢測試劑盒

閱讀:474發(fā)布時間:2012-7-25

人弓形蟲抗體IgGELISA 檢測試劑盒            

本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

試驗原理:
    TOXO-IgG試劑盒是間接法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知TOXO-IgG濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將TOXO-IgG和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中TOXO-IgG的濃度呈比例關系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人弓形蟲抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

人弓形蟲抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

人弓形蟲抗體IgGELISA 檢測試劑盒

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的TOXO-IgG標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的TOXO-IgG含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。

3、檢測值范圍:0-40IU/L

4、敏感度: 0.1 IU/L

Indole-6-carboxaldehyde 6-吲哚甲醛 [1196-69-6] 5g
3-Indole propionic acid 3-吲哚丙酸 [830-96-6] 25g
3-Indole propionic acid 3-吲哚丙酸 [830-96-6] 100g
3-Indole butyric acid, potassium salt 3-吲哚丁酸鉀 [60096-23-3] 25g
3-Indole butyric acid, potassium salt 3-吲哚丁酸鉀 [60096-23-3] 100g
Indoline 二氫吲哚 [496-15-1] 100g
Light green SF 亮綠SF [5141-20-8] 100g
Light green SF 亮綠SF [5141-20-8] 25g
Lissamine green B  酸性綠 50 [3087-16-9] 25g
Luminol 魯米諾 [521-31-3] 1g
Indoxyl-Gal 3-吲哚基-beta-D-吡喃半乳糖苷 [126787-65-3] 100mg
Indoxyl-Glucoside 3-吲哚基-beta-D-吡喃葡萄糖苷 [487-60-5] 100mg
Indoxyl-Glucuronide 3-吲哚基-beta-D-葡糖苷酸環(huán)已胺鹽 [35804-66-1] 100mg
Inosine * [58-63-9] 100g
Inosine 5’-triphosphate trisodium salt *5’-三磷酸三鈉 [35908-31-7] 250mg
Inosine 5’-triphosphate trisodium salt *5’-三磷酸三鈉 [35908-31-7] 1g
INT dye 碘硝基四唑紫 [146-68-9] 1g
Iodine standard solution 碘標準溶液 (0.1M) / 100ml
Iohexol * [66108-95-0] 5g
Iohexol * [66108-95-0] 25g
D-myo-Inositol 肌醇 [87-89-8] 100g
D-myo-Inositol 肌醇 [87-89-8] 500g
Inulin from chicory 菊粉 [9005-80-5] 100g
Iodic acid 碘酸 [7782-68-5] 100g
Iodine 碘 [7553-56-2] 100g
Isoquercitrin 異槲皮苷 [21637-25-2] 100mg
Isorhamnetin 異鼠李素 [480-19-3] 100mg
Isovanillin 異* [621-59-0] 50g
Janus Green B 健那綠 [2869-83-2] 25g
Iodine bromide 一溴化碘 [7789-33-5] 100g
Iodine chloride 一氯化碘 [7790-99-0] 25g
Iodine pentoxide 五氧化二碘 [12029-98-0] 25g
Iodine trichloride 三氯化碘 [865-44-1] 100g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 5g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 25g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 5g
Iodoacetamide 碘乙酰胺 [144-48-9] 30g
Iodoacetic acid 碘乙酸 [64-69-7] 25g
Iodoacetic acid, sodium salt 碘乙酸鈉 [305-53-3] 5g
Iodoacetyl LC Biotin / 100mg
Iodobenzene 碘代苯 [591-50-4] 10g
3-Iodobenzoic acid 3-碘苯甲酸 [618-51-9] 10g
4-Iodobenzoic acid 4-碘苯甲酸 [619-58-9] 10g
Lysostaphin 溶葡球菌酶, [9011-93-2] 1mg
5-Iodo-2’-deoxycytidine 5-碘 2’-脫氧胞苷 [611-53-0] 250mg
5-Iodo-2’-deoxycytidine 5-碘 2’-脫氧胞苷 [611-53-0] 1g
5-Iodo-2’-deoxyuridine 5-碘 2’-脫氧尿苷 [54-42-2] 1g
4-Iodophenoxyacetic acid 4-碘苯氧基乙酸 [1878-94-0] 25g
4-[3-(4-Iodophenyl)-2-(2,4-dinitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]-1,3-benzenedisulfonate sodium salt 水性四氮唑-3 (2-(4-碘苯基)-3-(2,4-二硝基苯基)-5-苯基-3H-四唑鎓-2',4'-二磺酸鈉鹽) IPB [161617-45-4] 100mg
2-(4-Iodophenyl)-3-(4-nitrophenyl)-5-(2,4-disulfophenyl)-2H-tetrazolium sodium salt 水溶性四氮唑-1;2-(4-碘苯)-3-(4-硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四氮唑鈉鹽 [150849-52-8] 100mg


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