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技術(shù)文章

凱氏定氮法

閱讀：1301發(fā)布時(shí)間：2011-12-8

凱氏定氮法 
 凱氏定氮法是測定化合物或混合物中總氮量的一種方法。即在有催化劑的條件下，用濃硫酸消化樣品將有機(jī)氮都轉(zhuǎn)變成無機(jī)銨鹽，然后在堿性條件下將銨鹽轉(zhuǎn)化為氨，隨水蒸氣餾出并為過量的酸液吸收，再以標(biāo)準(zhǔn)堿滴定，就可計(jì)算出樣品中的氮量。由于蛋白質(zhì)含氮量比較恒定，可由其氮量計(jì)算蛋白質(zhì)含量，故此法是經(jīng)典的蛋白質(zhì)定量方法。
凱氏定氮法是基于待測天然含氮有機(jī)物與濃硫酸共熱時(shí)，會被氧化成為二氧化碳和水，
然后堿化蒸餾使氨游離，用硼酸吸收后再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)，即為蛋白質(zhì)含量。 　　
1. 有機(jī)物中的胺根在強(qiáng)熱和CuSO4，濃H2SO4 作用下，硝化生成（NH4）2SO4
反應(yīng)式為：2NH2+H2S04+2H＝（NH4）2S04 （其中CuSO4做催化劑） 　　
2.在凱氏定氮器中與堿作用，通過蒸餾釋放出NH3 ，收集于H3BO3 溶液中 　　
反應(yīng)式為：（NH4）2SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO4 　　
2NH3+4H3BO3＝（NH4）2B4O7+5H2O 　　
3. 用已知濃度的H2SO4（或HCI）標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定，根據(jù)HCI消耗的量計(jì)算出氮的含量，然 后乘以相應(yīng)的換算因子，既得蛋白質(zhì)的含量 　　
反應(yīng)式為：（NH4）2B4O7+H2SO4+5H2O＝（NH4）2SO4+4H3BO3 　　
（NH4）2B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3
 
 


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