犬白細(xì)胞分化抗原ELISA試劑盒
實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1. 儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘，微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2. 洗液的配制：按 1:100的比例配制洗液備用。 樣品收集、處理及保存
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無菌管收集上清液，以1000×g離心15
分鐘，收集上清。
2. 細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞 3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到10^4-10^6/ml左右，通過反復(fù)凍融，
使細(xì)胞破壞，并放出細(xì)胞內(nèi)成份?；蛘呒?xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測。
3. 血清： 在室溫 下， 血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測。
4. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇 EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置 10 -20 分鐘后，
以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5. 體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集 ，以 1000×g
離心、15 分鐘 ，收集上清。
6. 組織標(biāo)本：切取 組織標(biāo)本，稱取重量0.5mg加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，超聲破碎儀，
將標(biāo)本勻漿，以2000 -300rmp離心 20 分鐘 ，收集上清進(jìn)行檢測 。
7. 樣品 中不能含有 NaN3，因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的（ HRP）活性。
8. 保存 ：如果樣品不能立即檢測，應(yīng)將其分裝，-80 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過程中如出現(xiàn)
沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高脂。如果血清中含大量顆粒，檢測前先離心
或過濾。不要在 37 ℃或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解 或更高的溫度加熱解或更高的溫度
加熱解或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解并確保樣品均勻地充分解凍。
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