在對(duì)蔬菜、水果中農(nóng)藥殘留的檢測(cè)過(guò)程中,要消除或控制影響分析結(jié)果的各種誤差,以保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性、溯源性。
1 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
溶劑、試劑和吸附劑的純度及適用性,不僅直接影響測(cè)定結(jié)果而且對(duì)氣相色譜儀中的色譜柱、檢測(cè)器也有一定的影響,因此在實(shí)驗(yàn)前必須測(cè)試每批次空白試劑、吸附劑和試劑的可用性。對(duì)溶劑而言一般每批溶劑取100～200mL濃縮,定容lmL,進(jìn)樣1μL無(wú)干擾峰即可。而且在分析測(cè)定時(shí),為避免交叉污染,要做全程序空白實(shí)驗(yàn),確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性、重現(xiàn)性。按比例配制的混合溶劑,由于各溶劑的沸點(diǎn)不同,放置時(shí)的揮發(fā)程度不同,比例易改變,因此混合溶劑宜現(xiàn)用現(xiàn)配。
2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是固體的,稱量時(shí)要快、準(zhǔn),溶解并定容,定容所用溶劑與樣品預(yù)處理所用溶劑相同。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)是液體的,按要求配制。同時(shí)配制標(biāo)準(zhǔn)工作系列,并在氣相色譜儀上測(cè)定其標(biāo)準(zhǔn)工作系列并繪制校準(zhǔn)曲線。由于低濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液穩(wěn)定性差,易揮發(fā),導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度降低,因此,在測(cè)樣時(shí)先作單點(diǎn)或多點(diǎn)校正,以確定其濃度及變化的程度,以便及時(shí)重新配制標(biāo)準(zhǔn)溶液,從而確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性,再現(xiàn)性。在配制混合標(biāo)準(zhǔn)溶液時(shí)要依據(jù)各農(nóng)藥組分響應(yīng)值的大小,取不同的量來(lái)配制,使各組分響應(yīng)值大致持平。
3 樣品制備
3. 1 樣品預(yù)處理
取樣必須要有代表性,采用科學(xué)的抽樣方法以確定檢測(cè)數(shù)據(jù)的科學(xué)性和準(zhǔn)確性。對(duì)于蔬菜、水果而言,需把不要的部位去掉,采用四分法縮分,并切碎、打漿,稱量。而且在每次切碎、打漿前都必須洗凈所用的工具,避免樣品之間的污染。
3. 2 樣品前處理
樣品前處理的基本要求就是減少待測(cè)農(nóng)藥的損失,提高回收率;排除雜質(zhì)的干擾;保持各操作的一致性。
3. 2. 1 提取 提取過(guò)程很重要,提取的與否直接影響測(cè)定結(jié)果,在分析過(guò)程中雖不能控制提取效率,但在分析過(guò)程中應(yīng)盡可能保持確證的提取程序不變。提取劑的選擇根據(jù)相似相溶的原理,盡量選用對(duì)待測(cè)農(nóng)藥溶解度大的溶劑并盡量減少雜質(zhì)的提取,提取劑可用單劑或混合溶劑。提取方法可采用浸泡過(guò)夜、振蕩提取、超聲波提取、索氏提取等,一般采用浸泡過(guò)夜和振蕩提取相接合的方法來(lái)提取。
3. 2. 2 凈化 將提取液凈化,凈化方式有液液分配、柱層析等,其目的都是去除雜質(zhì),減少干擾。在液液分配方式凈化中,開(kāi)始萃取時(shí),要多次排氣,特別是低沸點(diǎn)溶劑,如二氯甲烷等;分層較好時(shí), 注意分液漏斗壁上的水氣泡,當(dāng)有乳化現(xiàn)象不易分層時(shí),應(yīng)長(zhǎng)時(shí)間靜置、機(jī)械攪動(dòng)、加電介質(zhì)或離心。萃取次數(shù)要根據(jù)每次的萃取效率來(lái)定。用柱層析方式凈化時(shí),一般采用濕法裝柱比較好控制,在淋洗時(shí)要做淋洗曲線,同時(shí)要注意淋洗速度,不要太快,否則收率低,分離不好。裝柱時(shí)要注意每一層一定要敲實(shí),而且各層之間界面要平整、清晰,在預(yù)淋洗、上樣、冼脫時(shí)柱中液面降至柱填充劑表面時(shí)再進(jìn)行下一步操作,以保證淋洗效果。
3. 3. 3 濃縮定容 經(jīng)凈化后的樣液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮后轉(zhuǎn)移、定容。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)是減壓蒸餾,密閉性高,蒸發(fā)速度快,但注意流速不能快, 不要蒸干, 在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)時(shí)溫度要小于40℃。
4 樣品分析
將制備好的樣品上機(jī)測(cè)定。
1)在樣品測(cè)定前必須進(jìn)行單點(diǎn)或多點(diǎn)校正,以確定標(biāo)準(zhǔn)溶液的有效性。
2)每批樣品檢測(cè)都要進(jìn)行混合標(biāo)樣的測(cè)試,空白樣及添加空白樣的測(cè)試,同時(shí)每一測(cè)試農(nóng)藥的色譜參數(shù)(如分離度、拖尾因子、相對(duì)響應(yīng)值等)應(yīng)符合方法性能要求,相對(duì)保留時(shí)間的變幅應(yīng)在2%以內(nèi)。介質(zhì)的干擾峰不應(yīng)大于等于0. 3LCL (*校正水平,即與規(guī)定的*殘留比較,檢測(cè)方法應(yīng)該達(dá)到的*檢測(cè)濃度) ,若存在介質(zhì)效應(yīng),則需要使用添加介質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在測(cè)定時(shí),可用標(biāo)準(zhǔn)和樣品交替進(jìn)樣的辦法來(lái)減少誤差。
3)準(zhǔn)確度和精密度。每批至少做兩個(gè)添加濃度的回收,當(dāng)符合要求后檢測(cè)數(shù)據(jù)方可報(bào)出,否則必須查找原因重新檢測(cè)。
5 數(shù)據(jù)處理
5. 1 標(biāo)準(zhǔn)溶液的定量計(jì)算及其濃度的有效數(shù)字
標(biāo)準(zhǔn)溶液的定量計(jì)算是在整個(gè)測(cè)定過(guò)程中響應(yīng)值變化不大時(shí),采用前、中、后測(cè)定值取平均值,即全過(guò)程平均。標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度的有效數(shù)字由其純度、取樣量和量器決定。
5. 2 測(cè)定數(shù)據(jù)的計(jì)算
首先對(duì)所測(cè)定的結(jié)果進(jìn)行定性分析,判斷、確認(rèn)后,再選擇合適的積分條件,進(jìn)行積分,并定量計(jì)算。
5. 3 報(bào)告結(jié)果的有效數(shù)字
報(bào)告結(jié)果的有效數(shù)字要依據(jù)取樣量、標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度和儀器的精度等多個(gè)值的有效數(shù)字的位數(shù)來(lái)決定,報(bào)告結(jié)果時(shí),測(cè)定結(jié)果的誤差只取一位,測(cè)定結(jié)果有效數(shù)字的*后一位即為誤差的對(duì)應(yīng)位。
原創(chuàng)作者：北京普瑞分析儀器有限公司
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