我國測定葉綠素a的方法主要有分光光度法和熒光分光光度法，發(fā)布的《HJ 897-2017 水質(zhì) 葉綠素a的測定 分光光度法》、頒布的“水質(zhì)葉綠素的濃度測分光光度法(SL88-1994現(xiàn)已廢止被代替)及海洋監(jiān)測規(guī)范 第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測GB17378.7-2007。其中SL88-1994與《水和廢水監(jiān)測分析方法》(第四版增補版)中“葉綠素a的測定方法"在樣品處理和計算公式都相同，屬干丙酮研磨萃取法。而SL88-2012與GB17378.7-2007在樣品處理和計算公式相同，屬于丙酮反復凍融-浸提法。
我們采用了熒光檢測技術(shù)，該技術(shù)是利用浮游植物體內(nèi)的葉綠素受特定波長的光激發(fā)后產(chǎn)生的熒光與其濃度在一定范圍內(nèi)呈線性關(guān)系的原理,因此通過檢測浮游植物中葉綠素a發(fā)出的熒光強度即可實現(xiàn)對浮游植物的定量測定。
水質(zhì)葉綠素a分光光度法的采集、保存和測定
1、樣品采集：樣品的采集一般使用有機玻璃采水器或其他適當?shù)牟蓸悠鞑杉嫦?.5m樣品，湖泊、水庫根據(jù)需要可進行分層采樣或混合采樣，采樣體積為1L或500ml如果樣品中含沉降性固體( 如泥沙等), 應將樣品搖勻后倒入2L量筒，避光靜置30min,取水面下5cm樣品，轉(zhuǎn)移至采樣瓶。 在每升樣品中加入1ml碳酸鎂懸濁液， 以防止酸化引起色素溶解。
注:如果水深不足0.5m在水深1/2處采集樣品，但不得混入水面漂浮物。
2、樣品保存：樣品采集后應在0C~4C避光保存、運輸，24h內(nèi)運送至檢測實驗室過濾(若樣品24h內(nèi)不能送達檢測實驗室，應現(xiàn)場過濾，濾膜避光冷凍運輸)，樣品濾膜于-20C避光保存，14d內(nèi)分析完畢。
注:樣品采集后，如條件允許，宜盡快分析完畢。
3、樣品測定：將一定量樣品用濾膜過濾截留藻類，研磨破碎藻類細胞，用丙酮提取葉綠素，離心后于特定波長下測定提取液吸光度，根據(jù)公式計算水中葉綠素a濃度。
