人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒
英文簡稱：Human heat shock protein 90 (HSP-90) ELISA kit

產(chǎn)品貨號(hào)：KS12906

品牌名稱：科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運(yùn)輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測,不得用于臨床.

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒組成：

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒操作步驟

• 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測定：以空白孔調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
• 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
• 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請(qǐng)避光保存。
• 嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
• 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS14418 人U1小核核糖核蛋白A(SNRPA)ELISA試劑盒

KS14419 人UV切除修復(fù)蛋白R(shí)AD23同源物A(RAD23A)ELISA試劑盒

KS14420 人vav3鳥嘌呤核苷酸交換因子(VAV3)ELISA試劑盒

KS14421 人vrel禽網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞過多癥病毒癌基因同源物B(RelB)ELISA試劑盒

KS14422 人Wnt3a蛋白(WNT3A)ELISA試劑盒

KS14423 人ZDNA結(jié)合蛋白1(ZBP1)ELISA試劑盒

KS14424 人α1β糖蛋白(α1βGP)ELISA試劑盒

KS14425 人α1防御素(DEFA1)ELISA試劑盒

KS14426 人α1抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA試劑盒

KS14427 人α1微球蛋白(MGα1)ELISA試劑盒

KS14428 人α1微球蛋白/bikunin前體(AMBP)ELISA試劑盒

KS14429 人α半乳糖基(αGal)ELISA試劑盒

KS14430 人α淀粉酶(AMY1)ELISA試劑盒

KS14431 人α防御素4(NP4)ELISA試劑盒

KS14432 人α輔肌動(dòng)蛋白1(ACTN1)ELISA試劑盒

KS14433 人α輔肌動(dòng)蛋白4(ACTN4)ELISA試劑盒

KS14434 人α黑色素細(xì)胞刺激素(αMSH)ELISA試劑盒

KS14435 人α肌動(dòng)蛋白(αActin)ELISA試劑盒

KS14436 人α葡萄糖苷酶(αGlu)ELISA試劑盒

KS14437 人α酮戊二酸脫氫酶(αKGDHC)ELISA試劑盒

KS14438 人α烯醇化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)ELISA試劑盒

KS14439 人β1,4N乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(B4GALNT2)ELISA試劑盒

KS14440 人β2微球蛋白(MGβ2)ELISA試劑盒

KS14441 人β2微球蛋白(β2MG)ELISA試劑盒

KS14442 人β2整合素(ITGβ2/CD11+CD18)ELISA試劑盒

KS14443 人β2轉(zhuǎn)鐵蛋白(β2TF)ELISA試劑盒

KS14444 人β4整合素(ITGβ4/CD104)ELISA試劑盒

KS14445 人β氨基己糖苷酶A(βHexA)ELISA試劑盒

KS14446 人β淀粉樣蛋白(Aβ)ELISA試劑盒

KS14447 人β淀粉樣蛋白2535(Aβ2535)ELISA試劑盒

KS14448 人β淀粉樣多肽42(ABeta42)ELISA試劑盒

KS14449 人β淀粉樣多肽42(Aβ42)ELISA試劑盒

KS14450 人β淀粉樣前體蛋白(βAPP)ELISA試劑盒

KS14451 人β防御素(βDefensin)ELISA試劑盒

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KS14453 人β防御素104(DEFB104A)ELISA試劑盒