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人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒說(shuō)明書(shū)

時(shí)間:2021/7/22閱讀:133
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人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒的詳細(xì)資料:

英文名稱:Human cytokeratin 20 (CK-20) ELISA kit

貨號(hào):KS10284

規(guī)格:96T/48T

使用范圍:科研范圍內(nèi)使用

各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊… 
標(biāo)本齊全:血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關(guān)節(jié)液、胸腔yi液等… 
保存條件:2-8℃ 
實(shí)驗(yàn)原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)。往預(yù)先包被人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人肌酸激酶腦型同工酶(CK-BB)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),計(jì)算樣品濃度。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜后于1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8°C 1000g離心20分鐘,或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:1000g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

注:標(biāo)本溶血會(huì)影響后檢測(cè)結(jié)果,因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標(biāo)儀(450nm)

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

試劑準(zhǔn)備

試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡后方可使用。

20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒操作步驟

1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

3. 樣本孔中加入待測(cè)樣本50μL;空白孔不加。

4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)

1. 嚴(yán)格按照規(guī)定的時(shí)間和溫度進(jìn)行溫育以保證準(zhǔn)確結(jié)果。所有試劑都必須在使用前達(dá)到室溫20-25℃。使用后立即冷藏保存試劑。

2. 洗板不正確可以導(dǎo)致不準(zhǔn)確的結(jié)果。在加入底物前確保盡量吸干孔內(nèi)液體。溫育過(guò)程中不要讓微孔干燥掉。

3. 消除板底殘留的液體和手指印,否則影響OD值。

4. 底物顯色液應(yīng)呈無(wú)色或很淺的顏色,已經(jīng)變藍(lán)的底物液不能使用。

5. 避免試劑和標(biāo)本的交叉污染以免造成錯(cuò)誤結(jié)果。

6. 在儲(chǔ)存和溫育時(shí)避免強(qiáng)光直接照射。

7. 平衡至室溫后再打開(kāi)密封袋以防水滴凝聚在冷板條上。

8. 任何反應(yīng)試劑不能接觸漂白溶劑或漂白溶劑所散發(fā)的強(qiáng)烈氣體。任何漂白成分都會(huì)破壞試劑盒中反應(yīng)試劑的生物活性。

9. 不能使用過(guò)期產(chǎn)品。

10. 如果可能傳播疾病,所有的樣品都應(yīng)管理好,按照規(guī)定的程序處理樣品和檢測(cè)裝置。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。

自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。

人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品:

KS16501 牛白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒

KS16502 牛白介素22(IL22)ELISA試劑盒

KS16503 牛γ干擾素(IFNγ)ELISA試劑盒

KS16504 牛γ氨基丁酸(GABA)ELISA試劑盒

KS16505 牛β羥基丁酸脫氫酶(βHBDH)ELISA試劑盒

KS16506 牛β內(nèi)啡肽(βEP)ELISA試劑盒

KS16507 牛β干擾素(IFNβ/IFNB)ELISA試劑盒

KS16508 牛β防御素(βDefensin)ELISA試劑盒

KS16509 牛α乳清蛋白(αLa)ELISA試劑盒

KS16510 牛α晶體B鏈(CRYAB)ELISA試劑盒

KS16511 牛α干擾素(IFNα)ELISA試劑盒

KS16512 牛α2纖溶酶抑制物(α2PI)ELISA試劑盒

KS16513 牛α2HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒

KS16514 牛Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒

KS16515 牛Toll樣受體2(TLR2)ELISA試劑盒

KS16516 牛TEK內(nèi)皮細(xì)胞酪氨酸激酶(Tie2)ELISA試劑盒

KS16517 牛S100鈣結(jié)合蛋白A9(S100A9)ELISA試劑盒

KS16518 牛S100鈣結(jié)合蛋白A8(S100A8)ELISA試劑盒

KS16519 牛S100鈣結(jié)合蛋白(S100)ELISA試劑盒

KS16520 牛P物質(zhì)(SP)ELISA試劑盒

KS16521 牛N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶(NAG)ELISA試劑盒

KS16522 牛N端前腦鈉素(NTproBNP)ELISA試劑盒

KS16523 牛E選擇素(SELE)ELISA試劑盒

KS16524 牛D乳酸(DLAC)ELISA試劑盒

KS16525 牛C肽(CPeptide)ELISA試劑盒

KS16526 牛CD21(CR2)ELISA試劑盒

KS16527 牛B淋巴細(xì)胞活化抗原B72(LAB72)ELISA試劑盒

KS16528 牛Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒

KS16529 牛Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)ELISA試劑盒

KS16530 牛5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)ELISA試劑盒

KS16531 牛1磷脂酰肌醇4,5二磷酸磷酸二酯酶ζ1(PLCZ1)ELISA試劑盒

KS16532 牛17羥孕酮(17OHP)ELISA試劑盒

KS16533 牛1,25二羥基維生素D3(1,25DHVD3)ELISA試劑盒

KS16534 牛組織金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP4)ELISA試劑盒

KS16535 牛組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒

KS16536 牛組織蛋白酶D(CTSD)ELISA試劑盒

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