人活性氧簇（ROS）ELISA 檢測試劑盒 使用說明書 

檢測原理

    試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往 預(yù)先包被活性氧簇（ROS）抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準 品、HRP標記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色， TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終 的黃色。顏色的深淺和樣品中的活性氧簇（ROS）呈正相關(guān)。用酶標 儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。 

樣品收集、處理及保存方法 

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細 胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心 地分離。 

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。 

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物。 

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘 取上清。 

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存 于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

自備物品 

1. 酶標儀（450nm） 

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 

3. 37℃恒溫箱