人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱：Human glutamic acid decarboxylase 65 (GAD65) ELISA kit

產(chǎn)品貨號(hào)：KS14713

品牌名稱：科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運(yùn)輸方式：快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格：*，歡迎在線留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒組成：

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒操作步驟

• 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
• 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
• 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請(qǐng)避光保存。
• 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
• 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人谷氨酸脫羧酶65(GAD65)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS17785 豬去乙酰化饑餓激素(dGHRL)ELISA試劑盒

KS13189 豬熱休克蛋白20(HSP-20)ELISA試劑盒

KS10240 豬熱休克蛋白40(HSP-40)ELISA試劑盒

KS18080 豬熱休克蛋白40ELISA試劑盒

KS17784 豬熱休克蛋白60(HSPD1/Hsp60)ELISA試劑盒

KS10408 豬熱休克蛋白70(HSP-70)ELISA試劑盒

KS17783 豬熱休克蛋白70kDa蛋白1A(HSPA1A)ELISA試劑盒

KS12444 豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒

KS17782 豬乳酸脫氫酶(LDH)ELISA試劑盒

KS17987 豬乳鐵傳遞蛋白(LTF)ELISA試劑盒

KS17781 豬乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

KS17780 豬三dian甲狀腺原氨酸(T3)ELISA試劑盒

KS17986 豬三葉因子2(TFF2)ELISA試劑盒

KS17779 豬色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

KS17985 豬上皮性鈣黏附蛋白(CDHE)ELISA試劑盒

KS17778 豬神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒

KS17984 豬神經(jīng)介素S(NMS)ELISA試劑盒

KS17983 豬神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒

KS17777 豬神經(jīng)特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒

KS17776 豬神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA試劑盒

KS17982 豬神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子3(NT3)ELISA試劑盒

KS10298 豬腎上腺素(EPI)ELISA試劑盒

KS17981 豬腎上腺髓質(zhì)素(ADM)ELISA試劑盒

KS17775 豬腎素(Renin)ELISA試劑盒

KS17774 豬生長(zhǎng)分化因子9(GDF9)ELISA試劑盒

KS13056 豬生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒

KS12537 豬生長(zhǎng)激素釋放多肽(GHRP)ELISA試劑盒

KS12213 豬生長(zhǎng)激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)ELISA試劑盒

KS17773 豬生長(zhǎng)激素受體(GHR)ELISA試劑盒

KS17772 豬生長(zhǎng)激素抑制素受體5(SSTR5)ELISA試劑盒

KS11441 豬生長(zhǎng)抑素(SS)ELISA試劑盒

KS17980 豬生長(zhǎng)抑素(SST)ELISA試劑盒

KS12936 豬食欲素/阿立新B(OX-B)ELISA試劑盒

KS12019 豬食欲素受體(OXR)ELISA試劑盒

KS11153 豬瘦素(LEP)ELISA試劑盒

KS17979 豬瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒