人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒
英文簡(jiǎn)稱(chēng)：Apoptosis-related protein kinase (DAPK) ELISA kitt

產(chǎn)品貨號(hào)：KS14621

品牌名稱(chēng)：科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格：96T/48T
運(yùn)輸方式：快遞(根據(jù)客戶(hù)要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)
產(chǎn)品價(jià)格：*，歡迎在線(xiàn)留言洽談！
使用范圍：僅供科研檢測(cè),不得用于臨床.

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理：

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠胰島素（INS）水平。用純化的小鼠胰島素（INS）捕獲抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素（INS）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中小鼠胰島素（INS）含量。

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒組成：

注：標(biāo)準(zhǔn)品濃度依次為：40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒操作步驟

• 標(biāo)準(zhǔn)品的加樣：設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；。
• 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
• 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑100μl，空白孔除外。
• 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
• 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
• 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
• 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘. 
• 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
• 測(cè)定：以空白孔調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：

• 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
• 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
• 各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間zuei好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
• 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，zuei好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第yi孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
• 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
• 底物請(qǐng)避光保存。
• 嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
• 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
• 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書(shū)有異，以英文說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。

計(jì)算：

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，    

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)樣品的OD      

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋      

倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)      

準(zhǔn)曲線(xiàn)的直線(xiàn)回歸方程式，將樣品的OD值      

代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋      

倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。                  

人凋亡相關(guān)蛋白激酶(DAPK)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS15132 人神經(jīng)型一氧化氮合成酶(nNOS)ELISA試劑盒

KS15133 人腎胺酶(RNLS/MAOC)ELISA試劑盒

KS15134 人腎上腺髓質(zhì)素前體(ProADM)ELISA試劑盒

KS15135 人生存素(survivin)ELISA試劑盒

KS15136 人生長(zhǎng)分化因子2(GDF2)ELISA試劑盒

KS15137 人生長(zhǎng)分化因子3(GDF3/UNQ222/PRO248)ELISA試劑盒

KS15138 人生長(zhǎng)激素(GH)ELISA試劑盒

KS15139 人生長(zhǎng)激素(HGH)ELISA試劑盒

KS15140 人生長(zhǎng)激素釋放肽(Ghrelin)ELISA試劑盒

KS15141 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β/黑素瘤生激因子(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA試劑盒

KS15142 人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ/黑素瘤生激因子(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA試劑盒

KS15143 人嗜肺軍團(tuán)菌抗原(LPAg)ELISA試劑盒

KS15144 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員1(EAR1)ELISA試劑盒

KS15145 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員12(EAR12)ELISA試劑盒

KS15146 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員2(EAR2)ELISA試劑盒

KS15147 人嗜酸性白血球相關(guān)之RNA水解酵素家族成員3(EAR3)ELISA試劑盒

KS15148 人嗜酸性粒細(xì)胞陽(yáng)離子蛋白(ECP)ELISA試劑盒

KS15149 人嗜伊紅顆粒主要堿性蛋白(EMBP/MBP)ELISA試劑盒

KS15150 人受磷蛋白(PLN)ELISA試劑盒

KS15151 人受體TNFRSF結(jié)合絲氨酸蘇氨酸激酶2(RIPK2)ELISA試劑盒

KS15152 人受體型酪氨酸蛋白磷酸酶樣N(PTPRN)ELISA試劑盒

KS15153 人瘦素(Leptin)ELISA試劑盒

KS15154 人瘦素受體(LEPR)ELISA試劑盒

KS15155 人瘦素受體(LeptinR)ELISA試劑盒

KS15156 人水通道蛋白4抗體(AQP4Ab)ELISA試劑盒

KS15157 人水閘蛋白14(CLDN14)ELISA試劑盒

KS15158 人水蛭素(HRD)ELISA試劑盒

KS15159 人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶Braf(BRAF)ELISA試劑盒

KS15160 人絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶PAK4(PAK4)ELISA試劑盒

KS15161 人絲氨酸/蘇氨酸激酶24(STK24)ELISA試劑盒

KS15162 人絲氨酸蛋白酶HTRA1(HTRA1)ELISA試劑盒

KS15163 人絲氨酸蛋白酶抑制因子肽酶抑制因子進(jìn)化枝3G(Serpina3g)ELISA試劑盒

KS15164 人絲氨酸肽酶2甘露聚糖結(jié)合凝集素(MASP2)ELISA試劑盒

KS15165 人絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA試劑盒

KS15166 人絲裂原活化蛋白激酶激酶6(MKK6)ELISA試劑盒

KS15167 人絲狀血球凝集素(FHA)ELISA試劑盒