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人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒說明書

時間:2021/4/15閱讀:82
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人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒
英文簡稱Human C-type lectin domain family member 4 E (CLEC4E) ELISA kit

產(chǎn)品貨號:KS14320

品牌名稱:科順生物 
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T
運輸方式:快遞(根據(jù)客戶要求,選擇具體的運輸方式)
產(chǎn)品價格:*,歡迎在線留言洽談!
使用范圍:僅供科研檢測,不得用于臨床.

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素(INS)水平。用純的小鼠胰島素(INS)捕獲抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被的微孔中依次加入小鼠胰島素(INS),再與HRP標記的檢測抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催下轉(zhuǎn)成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠胰島素(INS)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠胰島素(INS)含量。

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說明書

1份

1份

 

封板膜

2片

2片

 

密封袋

1個

1個

 

酶標包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標準品

0.3ml×6管

0.3ml×6管

2-8℃保存

酶標試劑

5 ml×1瓶

10 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

20×濃縮洗滌液

15ml×1瓶

25ml×1瓶

2-8℃保存

注:標準品濃度依次為:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救?/span>后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧物酶的(HRP)活性。

 

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒操作步驟

  • 標準品的加樣:設(shè)置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;。
  • 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
  • 加酶:每孔加入酶標試劑100μl,空白孔除外。
  • 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育60分鐘。
  • 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用。
  • 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  • 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
  • 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。
  • 測定:以空白孔調(diào)零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒注意事項

  • 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  • 濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結(jié)果。
  • 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間zuei好控制在5分鐘內(nèi),如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  • 請每次測定的同時做標準曲線,zuei好做復(fù)孔。如標本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標準品孔第yi孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  • 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  • 底物請避光保存。
  • 嚴格按照說明書的操作進行,試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
  • 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  • 本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

計算:

以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,    

在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD      

值由標準曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋      

倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標      

準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值      

代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋      

倍數(shù),即為樣品的實際濃度。                  

人C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族4成員E(CLEC4E)ELISA試劑盒相關(guān)優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品:

KS15960 雞甘油醛3磷酸脫氫酶(GAPDH)ELISA試劑盒

KS15961 雞甘丙肽(GAL)ELISA試劑盒

KS15962 雞鈣結(jié)合蛋白(CALB2)ELISA試劑盒

KS15963 雞多巴胺(DA)ELISA試劑盒

KS15964 雞凋亡相關(guān)因子(FAS)ELISA試劑盒

KS15965 雞低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒

KS15966 雞的牛血清白蛋白(BSA)ELISA試劑盒

KS15967 雞蛋卵黃高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA試劑盒

KS15968 雞膽囊收縮素A受體(CCKAR)ELISA試劑盒

KS15969 雞催乳素(PRL/LTH)ELISA試劑盒

KS15970 雞促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA試劑盒

KS15971 雞促甲狀腺素(TSH)ELISA試劑盒

KS15972 雞雌二醇(E2)ELISA試劑盒

KS15973 雞觸珠蛋白相關(guān)蛋白(HPR)ELISA試劑盒

KS15974 雞補體蛋白4(C4)ELISA試劑盒

KS15975 雞補體蛋白3(C3)ELISA試劑盒

KS15976 雞丙酮酸脫氫酶E1(PDHE1)ELISA試劑盒

KS15977 雞丙二酸單酰輔酶A(malonylCoA)ELISA試劑盒

KS15978 雞丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)ELISA試劑盒

KS15979 雞半乳糖凝集素3(Gal3)ELISA試劑盒

KS15980 雞白介素8(IL8)ELISA試劑盒

KS15981 雞白介素6受體(IL6R)ELISA試劑盒

KS15982 雞白介素1β(IL1β)ELISA試劑盒

KS15983 雞白介素15(IL15)ELISA試劑盒

KS15984 雞白介素12(IL12/70)ELISA試劑盒

KS15985 雞白介素10(IL10)ELISA試劑盒

KS15986 雞β干擾素(IFNβ/IFNB)ELISA試劑盒

KS15987 雞α酮戊二酸脫氫酶(αKGDHC)ELISA試劑盒

KS15988 雞α1酸性糖蛋白(OGCHI)ELISA試劑盒

KS15989 雞α/β水解酶域包含蛋白5(ABHD5)ELISA試劑盒

KS15990 雞Toll樣受體4(TLR4)ELISA試劑盒

KS15991 雞G0/G1期開關(guān)基因(G0S2)ELISA試劑盒

KS15992 雞FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA試劑盒

KS15993 雞CD8分子(CD8)ELISA試劑盒

KS15994 雞CD4分子(CD4)ELISA試劑盒

KS15995 雞CD3分子(CD3)ELISA試劑盒

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