中文名：豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒
英文名：Classical swine fever virus (CSFV) ELISA kitt
供應(yīng)商:科順生物
規(guī)格：48T/96T
保存：2-8℃
有效期：6個(gè)月
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
使用范圍：僅供科研使用,不得用于臨床。
用途：用于測(cè)定人血清,血漿,組織及相關(guān)液體樣本中的含量或活性。
性能：敏感性高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性。
ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒基本原理：
①抗原或抗體能吸附到固相載體表面，并保持其免疫學(xué)活性；
②抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物，仍保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性；
③酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后，可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在，而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗(yàn)結(jié)果。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒標(biāo)本的采集及保存：
1. 血清：全血標(biāo)本請(qǐng)于室溫放置2小時(shí)或4℃過夜后于1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標(biāo)本采集后30分鐘內(nèi)于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：1000 x g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)?biāo)本放于-20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注：標(biāo)本溶血會(huì)影響zui后檢測(cè)結(jié)果，因此溶血標(biāo)本不宜進(jìn)行此項(xiàng)檢測(cè)。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒說明書樣品收集、處理方法：
1、血清-----室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心
2、血漿-----應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心
3、細(xì)胞培養(yǎng)上清---檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清
4、組織標(biāo)本-----切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用
5、培養(yǎng)細(xì)胞----- 檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒操作步驟：

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10 孔，在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從*孔、第二孔中各取100μl 分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl 棄掉，再各取50μl 分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl 分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl 加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl 棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為120 U/L ，80 U/L，40 U/L，20 U/L，10 U/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5 倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。

4. 配液：將30（48T 的20 倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T 的20 倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此重復(fù)5 次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色

15 分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm 波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD 值）。測(cè)定應(yīng)在加終止

液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)：
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3．  各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
3.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值），請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測(cè)定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。
4. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
5.底物請(qǐng)避光保存。
6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
8.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
9.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。

豬瘟病毒(CSFV)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品：

KS16854    犬E選擇素(SELE)ELISA試劑盒
KS16855    犬C肽(CPeptide)ELISA試劑盒
KS16856    犬C反應(yīng)蛋白(CRP)ELISA試劑盒
KS16857    犬CD8分子(CD8)ELISA試劑盒
KS16858    犬CD6分子(CD6)ELISA試劑盒
KS16859    犬CD4分子(CD4)ELISA試劑盒
KS16860    犬CD40配體(CD40L)ELISA試劑盒
KS16861    犬CD31分子(CD31)ELISA試劑盒
KS16862    犬CC趨化因子受體2(CCR2)ELISA試劑盒
KS16863    犬B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl2)ELISA試劑盒
KS16864    犬B淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC1/CXCL13)ELISA試劑盒
KS16865    犬Bcl2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒
KS16866    犬Ⅳ型膠原(ColⅣ)ELISA試劑盒
KS16867    犬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISA試劑盒
KS16868    犬25羥基維生素D3(25HVD3)ELISA試劑盒
KS16869    犬17羥孕酮(17OHP)ELISA試劑盒
KS16870    狗15酮基13,14二氫前列腺素F2α(15keto13,14dihydroPGF2α)ELISA試劑盒
KS16871    狗微管相關(guān)蛋白tau(MAPT)ELISA試劑盒
KS16872    犬組織金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP2)ELISA試劑盒
KS16873    犬組織金屬蛋白酶抑制因子1(TIMP1)ELISA試劑盒
KS16874    犬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒
KS16875    犬轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒
KS16876    犬脂蛋白關(guān)聯(lián)磷脂酶A2(LpPLA2)ELISA試劑盒
KS16877    犬誘導(dǎo)型一氧化氮合酶(NOS2)ELISA試劑盒
KS16878    犬血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒
KS16879    犬血管性血友病因子(vWF)ELISA試劑盒
KS16880    犬血管生成素1(ANGPT1)ELISA試劑盒
KS16881    犬血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子A(VEGFA)ELISA試劑盒
KS16882    犬血管緊張素Ⅰ(AngⅠ)ELISA試劑盒
KS16883    犬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)ELISA試劑盒
KS16884    犬細(xì)胞間粘附分子1(ICAM1)ELISA試劑盒
KS16885    犬調(diào)節(jié)激活正常T細(xì)胞表達(dá)分泌因子(RANTES)ELISA試劑盒
KS16886    犬瘦素(LEP)ELISA試劑盒
KS16887    犬葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4(GLUT4)ELISA試劑盒
KS16888    犬凝血因子Ⅷ(F8)ELISA試劑盒