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西安齊岳生物科技有限公司

外泌體制備指南

時(shí)間:2021-1-12閱讀:865
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西安齊岳生物科技有限公司是集化學(xué)和定制與一體的化學(xué)公司。業(yè)務(wù)范圍包括化學(xué)試劑和產(chǎn)品的、生產(chǎn)、銷售等。涉 及產(chǎn)品為通用試劑的分銷、非通用試劑的定制與,涵蓋生物科技、化學(xué)品、醫(yī)藥中間體和化工材料等領(lǐng)域。

外泌體制備指南:

 

一、貼壁/懸浮細(xì)胞(收集細(xì)胞上清,除去細(xì)胞或細(xì)胞碎片)

1貼壁細(xì)胞培養(yǎng)誘導(dǎo)結(jié)束后,培養(yǎng)液;

2加入適量的PBS緩沖液沖洗-,*FBS;

3按每10cm(107細(xì)胞) 10m|培養(yǎng)基,換外泌體無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)至少48hr (細(xì)胞融合率

至少70%以上) ;

448hr后,收集細(xì)胞上清,并于3000x g離心15min,細(xì)胞或細(xì)胞碎片;

(5)放入-80°C冰箱中保存。

二、提前做好血清或者血漿的分離

1)全血:通過采采集后,經(jīng)過抗凝處理的血液。

2)血漿:經(jīng)過抗凝處理的全血,進(jìn)行低速離心后的上清液,為淡液體。

3)血清:不經(jīng)過抗凝處理的血液,讓它自行凝固,在進(jìn)行低速離心后的上清液,為淡液體。

 不同樣本提取的外泌體比照圖:

 

  血漿樣本圖             血漿提取后的外泌體

全血樣本-已溶血狀態(tài)         溶血后提取的外泌體

具體全血樣本操作如下:

步驟一

采集外周血2mL (采血時(shí)間一般為早晨或上午),迅速轉(zhuǎn)入EDTA抗凝管中,渦旋或用移液器Tip混勻

步驟二

1小時(shí)(室溫條件下)2小時(shí)(4C條件下)內(nèi)進(jìn)行下面的操作: 4°C, 1900g (1568rpm) 離心10分鐘;

 

步驟三

吸取約1 mL上清轉(zhuǎn)至潔凈的1.5 mL離心管中,16,000g (13,200rpm), 4'C, 離心10分鐘,小心吸取.上清到新的離心管中;

步驟四

放入-80°C冰箱中保存;

 

步驟五

填寫樣本登記單,記錄樣本名稱、類型、編號、取樣日期、樣本處理過程等情況。

 

產(chǎn)品供應(yīng):

胞外囊泡/細(xì)胞微粒/微囊泡/外泌體/EVs/exosomes
含RNA和的小膜泡 (30-150nm)
綿羊網(wǎng)織紅細(xì)胞-外泌體
直徑40-100nm的盤狀囊泡
exosome/外泌體
細(xì)胞內(nèi)溶酶體微粒內(nèi)陷形成的多囊泡體
多囊泡體外膜與細(xì)胞膜融合后釋放到胞外基質(zhì)中
細(xì)胞在正常及病理狀態(tài)下均可分泌外泌體
細(xì)胞類型均可分泌外泌體
性分泌的膜泡
外泌體含和鞘磷脂
肥大細(xì)胞分泌外泌體
mRNA,exosomes具有生物活性
41860種、2838種microRNA、3408種mRNA
Rabs蛋白/鳥苷酸三磷酸酶(GTPases)
調(diào)節(jié)外泌體膜與受體細(xì)胞的融合
外泌體中含RAB4, RAB5和 RAB11,RAB7 和 RAB9
膜聯(lián)蛋白1、2、4、5、6、7、11
四跨膜蛋白家族(CD63, CD81 和CD9)
熱休克蛋白家族((HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90
細(xì)胞性的蛋白包括A33(結(jié)腸上皮細(xì)胞來源)
MHC-Ⅱ(抗原提呈細(xì)胞來源)
CD86(抗原提呈細(xì)胞來源)
乳凝集素(不成熟的樹突狀細(xì)胞)
外泌體中的蛋白含代謝類的酶
GAPDH
烯醇化酶 1
醛縮酶 1
PKM2
PGK1
PDIA3
GSTP1
DPP4
AHCY
TPL1
蛋白
P4HB
LDH
親環(huán)素 A
FASN,
MDH1
CNP
核糖體蛋白(RPS3)
信號轉(zhuǎn)導(dǎo)因子
黑色素分化相關(guān)因子
ARF1
CDC42
人類紅細(xì)胞膜整合蛋白
SLC9A3R1
粘附因子
MFGE8
整合素
細(xì)胞骨架蛋白
泛素
人體內(nèi)多種細(xì)胞及體液均可分泌外泌體
應(yīng)用:機(jī)體應(yīng)答
抗原提呈
細(xì)胞遷移
侵襲
細(xì)胞膜外泌體
外泌體產(chǎn)生于細(xì)胞中的多泡體
外泌體研究整體方案設(shè)計(jì);
外泌體提取/粒徑測量/電鏡檢測;
外泌體蛋白組/轉(zhuǎn)錄組
客戶提供樣本提取外泌體
外泌體抽離/抽提
全自動(dòng)外泌體熒光檢測分析系統(tǒng)
外泌體分離產(chǎn)品和工具
外泌體分離/提取
外泌體整體服務(wù)
外泌體lncRNA芯片
外泌體small RNA
外泌體提取
外泌體染色:PKH67/PKH26
外泌體WB鑒定
CD81外泌體慢包裝
CD63外泌體慢包裝
CD9外泌體慢包裝
外泌體粒徑檢測
外泌體電鏡檢測/透射電鏡
 
外泌體蛋白組分析
外泌體標(biāo)記/鑒定/分離/提取/
外泌體(Exosomes)鑒定
外泌體marker抗體
外泌體CD9抗體
外泌體CD81抗體
外泌體CD63抗體
外泌體分離單克隆抗體
Anti CD9,CD63,CD81
細(xì)胞外囊泡標(biāo)記外泌體單克隆抗體
細(xì)胞外囊泡(外泌體和微囊泡)
標(biāo)記外泌體試劑
外泌體流式細(xì)胞分子
外泌體細(xì)胞成像
外泌體細(xì)胞結(jié)構(gòu)成像
外泌體標(biāo)記化學(xué)
外泌體熒光選擇標(biāo)記
外泌體分析
外泌體科學(xué)
外泌體細(xì)胞示蹤
外泌體細(xì)胞追蹤
外泌體細(xì)胞形態(tài)學(xué)
外泌體單細(xì)胞分析
外泌體微生物分析
外泌體熒光微孔
外泌體RNA-微生物
FITC外泌體捕獲親和磁珠
CD63抗體捕獲外泌體
靶向外泌體
靶向衍生外泌體
外泌體仿生靶向科研
外泌體仿生納米科研/顆粒
外泌體可誘導(dǎo) T 細(xì)胞的凋亡
調(diào)控功能性 T 細(xì)胞 (Treg) 
誘導(dǎo) M2 巨噬細(xì)胞的極化
自然殺傷細(xì)胞 (NK) 的抗性
樹突狀細(xì)胞的 (DC) 分化為成熟 DC
外泌體基因改造

上述產(chǎn)品用于科研,產(chǎn)品和相關(guān)檢測服務(wù)均可提供!

wyf 01.12

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