近紅外熒光蛋白標記乳-腺細胞外泌體的構建及鑒定

齊岳生物提供一系列外泌體分離產(chǎn)品和工具，用于表征和分析其RNA和含量，以及體外和體內(nèi)追蹤，以幫助您進一步了解這些迷人的外泌體。外泌體是包含了復雜RNA和的小膜泡 (30–150nm)，由體外和體內(nèi)細胞持續(xù)分泌。由于人體內(nèi)復雜的功能，包括細胞間通訊和信號轉(zhuǎn)導，外泌體正在改變研究。這些細胞外囊泡正在生長，這既是為了了解其生物學功能，也是為了將其用于實際應用，如無創(chuàng)診斷和研究。

外泌體具有磷脂雙分子膜結構，導致其沉降系數(shù)和聚集體有著很大的不同。而且外泌體膜表面存在性膜蛋白如CD9和CD81，前者被和遷移有關，后者與丙型肝炎的侵染有關。而因為外泌體具有這些的易分離的特點，我們可以通過密度梯度離心，親和層析等方法對外泌體進行分離和純化。

近紅外熒光蛋白標記乳-腺細胞外泌體的構建及鑒定

    （摘） 外泌體(Exosomes)是一種大小為30~100 nm的細胞外膜囊泡,與細胞的生物學功能及細胞間的信號傳遞有著密切的關系,在癥的診斷及等領域發(fā)揮重要作用。為將外泌體地應用于乳-腺傳遞機制的研究,

   先通過分子克隆手段將近紅外熒光蛋白iRFP682基因和外泌體標記蛋白CD63基因克隆到含腺相關(Adeno-associated virus,AAV)末端倒置重復序列(Inverted repeat terminal,ITR)的質(zhì)粒載體上,構建融合表達近紅外熒光蛋白和CD63蛋白的重組真核表達載體。然后再與輔助質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染AAV-293細胞,包裝重組腺相關、純化測量滴度后用于乳-腺細胞,通過熒光篩選出穩(wěn)定表達近紅外熒光蛋白的乳-腺細胞株。通過對乳-腺穩(wěn)定株的分離、純化及鑒定,得到一個生物標記物：iRFP682標記的乳-腺細胞來源的外泌體,為后續(xù)研究外泌體在乳-腺微環(huán)境中的分布及信號傳遞提供保障。

應用：

外泌體在正常體環(huán)境和發(fā)病機制中的作用

    外泌體可以被認為是生物反應過程中的重要信號體。例如，外泌體可以應答或，從而參與監(jiān)視。在血液循環(huán)中，外泌體通過提供用于組裝凝血因子的場所而參與血凝反應。在大腦中，元可以通過外泌體的分泌進行交流，這有助于近端和遠端突觸的可塑性。外泌體也參與干細胞維持和可塑性，并且由于它們的抗細胞凋亡和性質(zhì)，它們似乎在受損的修復中具有重要作用。通過使用外泌體作為劑，可以將這些作用轉(zhuǎn)化為。此外，外泌體大多數(shù)細胞都可分泌，含有RNA并且能夠?qū)⑵鋬?nèi)容物轉(zhuǎn)移到受體細胞的，這表明它們將是適合科研遞送的候選物，是性核酸遞送。外泌體的相同性質(zhì)強調(diào)了它們在維持正常生理學中的重要作用，可使它們參與病理反應。例如，外泌體可通過誘導不需要的耐受，傳遞致基因（例如MET），核酸轉(zhuǎn)移來支持生長和相關病理。在出現(xiàn)的情況下，外泌體可以誘導針對自身抗原的應答。外泌體介導的朊蛋白轉(zhuǎn)運也可以推進退行性的進展;此外，HIV-1也與外囊泡結合進行轉(zhuǎn)移有關。由于它們參與，外泌體被認為是進行的靶標。

產(chǎn)品供應：

上述產(chǎn)品齊岳實驗室均可提供！

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