白介素elisa試劑盒
實(shí)驗(yàn)原理：本試劑盒應(yīng)用雙抗體加心法測定標(biāo)本中人白細(xì)胞介素-25（IL-25）水平。用純化的人IL-25抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素-25（IL-25），再與HRP標(biāo)記的IL-25抗體結(jié)合，形成抗體抗原美標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下準(zhǔn)話成藍(lán)色，并在算的作用下轉(zhuǎn)化成終黃色。顏色的深淺和樣品中的IL-25呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在-450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品多種人白細(xì)胞介素-25（IL-25）濃度。
操作步驟：
標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100ul，然后在、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)歐尼稀釋液50ul，混勻；然后一孔、第二孔中各取100ul分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，幻云，然后在第三孔和第四孔中先各取50ul棄掉，再各取50ul分別加到第五、第六孔中，再在第五第六孔中分別加便準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻，混勻后從第五、第六空中風(fēng)去50ul分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻后從第七、第八孔中分別去50ul加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻后從第九第十孔中各取50ul棄掉。
加樣：分別設(shè)空白孔、待測空白孔。在酶標(biāo)包被板上待測樣品孔重甲樣品稀釋液40ul,然后再加待測樣品10ul.加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕歡動混勻。
溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50ul,空白孔除外
顯色：每孔先假如顯色劑A50ul,再加入顯色劑B50ul，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。
終止：每孔加終止液50ul,終止反應(yīng)。
測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度。測定應(yīng)再加終止液后15分鐘內(nèi)進(jìn)行
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