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閱讀:405發(fā)布時(shí)間:2018-12-28
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小鼠淋巴細(xì)胞因子elisa檢測(cè)試劑盒 儲(chǔ)存方式
標(biāo)本的采集與保存:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆茫缬刑厥庠蛐枰芷谑占瘶?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。標(biāo)本2-8℃可保存48小時(shí),-20℃可保存1個(gè)月。-70度可保存6個(gè)月。部分激素類標(biāo)本需添加*。
◇液體類標(biāo)本: 標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測(cè)種類。取材前須向銷售人員索要說明書。
◇血清: 室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇血漿: 應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇尿液、胸腹水、腦脊液: 用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇細(xì)胞培養(yǎng)上清: 檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇組織標(biāo)本: 切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(*)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或-70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
小鼠淋巴細(xì)胞因子elisa檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說明:
為了便于計(jì)算,盡管濃度為自變量而 O.D. 值為因變量,我們繪圖時(shí)仍采用標(biāo)準(zhǔn)品的 O.D. 值作為橫坐標(biāo) (X 軸),標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為縱坐標(biāo) (Y 軸)。同時(shí)為了試驗(yàn)結(jié)果的直觀性,圖中提供的是原始數(shù)據(jù)而非對(duì)數(shù)值。*使用對(duì)數(shù) 值建立標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。由于實(shí)驗(yàn)操作條件的不同(如操作者、移液技術(shù)、洗板技術(shù)和溫度條件等),標(biāo)準(zhǔn)曲線的 O.D. 值會(huì)有所差異。所提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需要根據(jù)自已的實(shí)驗(yàn)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
小鼠淋巴細(xì)胞因子Elisa試劑盒用于檢測(cè) IL21,經(jīng)檢測(cè)與其它相似物質(zhì)無明顯交叉反應(yīng)。
由于受到技術(shù)及樣本來源的限制,不可能完成對(duì)所有相關(guān)或相似物質(zhì)交叉反應(yīng)檢測(cè),因此本試劑盒有可能與未經(jīng)檢測(cè)的其它物質(zhì)有交叉反應(yīng)。
穩(wěn)定性
經(jīng)測(cè)定小鼠淋巴細(xì)胞因子Elisa試劑盒在有效期內(nèi)按*溫度保存,其活性降低率小于 5%。
為減小外部因素對(duì)試劑盒破壞前后檢測(cè)值的影響,實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境條件需盡量保持一致,尤其是實(shí)驗(yàn)室內(nèi)溫度、濕度及溫育條件。其次由同一實(shí)驗(yàn)員來進(jìn)行操作可減少人為誤差。
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