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上海博湖生物科技有限公司
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閱讀:599發(fā)布時間:2020-8-26
胎盤生長因子試劑盒實驗步驟:
1:留意試劑盒保存期,過保存期的試劑不能運用。
2:評價試劑的實用性,試劑的穩(wěn)定與否,對率的高低到頭重要。在試劑啟用前,應進行陰、陽對照及樣品重復對比實驗,斷定試劑符合要求后方可運用。
3:嚴厲把握顯色時刻,顯色時刻過短,參加胎盤生長因子試劑盒停止液反應停止后,底物結(jié)合物的量過少,易呈現(xiàn)假陰性。超過顯色要求時刻后顯色,應判為假陽性,這可能與試劑本身有關。加顯色劑后當即顯色,不行報陽性,這可能是本底顯色的成果。
4:加樣要、快速。如果加樣不,酶生成物的量不能斷定,直接影響顯色成果。顯色的深淺及A值的測定與參加顯色劑和停止液的量胎盤生長因子試劑盒有關,所以加樣應穩(wěn)重。要求在必定時刻內(nèi)加樣結(jié)束的實驗,如果加樣緩慢,便呈現(xiàn)差錯,并且試劑長時刻暴露在外,特別室溫過高時,保存期會縮短乃至失效。
5:檢驗技師應具有從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能嫻熟操作實驗儀器、器械,具有必定總結(jié)和剖析問題的才干,對實驗中呈現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。
6:運用校對過的微量移液器,掃除自然差錯。移液器與否對定量檢測尤為重要。
7:仔細閱讀說明書,嚴厲依照說明書胎盤生長因子試劑盒要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不行混用。值得改善的當?shù)?,重復實驗斷定建立后才干改善?/p>
8:洗刷*,如若洗板不*,酶結(jié)合物本底顯色會呈現(xiàn)假陽性。洗刷液要新鮮,現(xiàn)用現(xiàn)配,陳腐的洗刷液會呈現(xiàn)本底增高現(xiàn)象,也可能呈現(xiàn)假陽性。
9:嚴控反應時刻,反應時刻過長,酶失活;反應時刻過短,酶結(jié)合物不能與血清中的微生物抗原抗體充沛結(jié)合,生成物結(jié)構(gòu)松懈胎盤生長因子試劑盒不結(jié)實,容易洗掉,都可能造成假陰性。
胎盤生長因子試劑盒原理:
胎盤生長因子試劑盒基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面胎盤生長因子試劑盒的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物胎盤生長因子試劑盒被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。
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