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如何解決ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中的誤差問題?

閱讀:233發(fā)布時(shí)間:2020-5-18

因?yàn)?span style="color:#FF0000">ELISA試劑盒試驗(yàn)操作過程雜亂,可能一個(gè)小小的差錯就會呈現(xiàn)大問題,那么我們要怎么解決并完善試驗(yàn)過程的差錯問題呢?

1、因?yàn)榈纹康木苄员囟ú蝗缂訕悠鳎慌懦煌晤^滴量的差錯。別的滴加過程中是否發(fā)生氣泡、速度是否均勻,是否顫抖等影響液量的因素均可導(dǎo)致以上狀況。高標(biāo)準(zhǔn)要求時(shí)應(yīng)運(yùn)用加樣器。

2、閾值鄰近實(shí)踐上是個(gè)灰區(qū),不能截然分為陰性、陽性,國外均要求對這部分可疑標(biāo)本進(jìn)行奇數(shù)次復(fù)檢,以次數(shù)多者為準(zhǔn),如一次陽兩次陰zui終判為陰,但實(shí)踐上是否為陰不好說,只要判為可疑,臨床上能夠讓患者過一段時(shí)間后再測。

3、肉眼調(diào)查稍顯色,酶標(biāo)儀打印為陰性的標(biāo)本在實(shí)踐工作中是難以避免的,肉眼目測成果不可靠,應(yīng)以酶標(biāo)儀判讀為準(zhǔn)。

4、不同的ELISA試劑盒,產(chǎn)品其工藝和操作方法會略有不同,必須依照所用試劑盒嚴(yán)格操作,不然容易發(fā)生檢測成果的不確定性。

5、加樣時(shí)樣品量差錯,關(guān)于陰或很陽的標(biāo)本影響不大,但對閾值鄰近的標(biāo)本影響極大,主張校正加樣器。

6、反應(yīng)時(shí)間的差錯,做很多標(biāo)本時(shí),孔和zui終一孔以及一些特別標(biāo)本可能影響較大。

7、由陰性變?yōu)閺?qiáng)陽性原因多為操作過程中漏加試劑等有關(guān)。

8、臨界值鄰近標(biāo)本動搖為正?,F(xiàn)象,任何ELISA試劑盒均不可避免。能夠考慮將標(biāo)本做奇數(shù)次復(fù)檢。

9、若不同批號試劑的不同組分(A液或酶工作液),或不同試劑的不同組分進(jìn)行穿插運(yùn)用,有可能呈現(xiàn)顯色淺或本底高,花板等景象。


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