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技術(shù)文章

人白介素ELISA試劑盒實驗中的常見問題以及注意事項

閱讀：490發(fā)布時間：2020-4-1

ELISA試劑盒實驗中總會出現(xiàn)各種各樣的問題，但是，只要操作人員掌握了一定的技巧，就可輕松找到問題的所在。以下內(nèi)容分析人白介素ELISA試劑盒實驗中的常見問題以及注意事項：

1、陰性對照顯色

2、整板不顯色

3、同一板內(nèi)重復(fù)性差

4、陽性對照讀數(shù)不正常

5、血清本底高

6、HCV血清本底高

7、HIV陽性對照低

8、陽性對照不顯色

9、陽性對照顯色淺

10、HIV血清本底高

11、假陽性結(jié)果

白介素ELISA試劑盒實驗操作注意事項：
1、 從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2、各步驟加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校準其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

3、每次試驗測定的同時做標準曲線，。如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔zui高濃度的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shù)（×n）。

4.手工洗板應(yīng)注意：甩掉酶標板內(nèi)的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。自動洗板：如果有自動洗板機，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實驗過程中。


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