古朵快訊：ELISA的配置與設(shè)備

　　技術(shù)原理及自備設(shè)備：

　　ELISA技術(shù)原理是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標(biāo)本與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。

　　自備設(shè)備有，蒸餾水，加樣器，振蕩器及磁力攪拌器，酶標(biāo)儀，量筒，燒杯，吸水紙，坐標(biāo)紙，溫育箱，洗瓶，一次性試劑管，微移液及其吸嘴等。

　　試劑盒組成及試劑配制：

　　1.酶聯(lián)板：一塊(96孔)。

　　2.標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品)：2瓶，每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml，蓋好后靜置10分鐘以上，然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為1,600pg/ml，將其稀釋為400pg/ml后，再做系列倍比稀釋(注：不要直接在板中進行倍比稀釋)，分別稀釋成400pg/ml，200pg/ml，100pg/ml，50pg/ml，25pg/ml，12.5pg/ml，6.25pg/ml，樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0pg/ml，臨用前15分鐘內(nèi)配制。如配制200pg/ml標(biāo)準(zhǔn)品：取0.5ml(不要少于0.5ml)400pg/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

　　3.樣品稀釋液：1×20ml。

　　4.檢測稀釋液A：1×10ml。

　　5.檢測稀釋液B：1×10ml。

　　6.檢測溶液A：1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A1:100稀釋，稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔)，實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內(nèi)配制。

　　7.檢測溶液B：1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。

　　8.底物溶液：1×10ml/瓶。

　　9.濃洗滌液：1×30ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

　　10.終止液：1×10ml/瓶(2NH2SO4)。

　　11.覆膜：5張。

　　12.使用說明書：1份。

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