??標(biāo)簽：多色流式實(shí)驗(yàn) 古朵生物 熒光素

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　　??次近十年來流式細(xì)胞儀已經(jīng)成為臨床醫(yī)生、免疫學(xué)家和細(xì)胞生物學(xué)家*的工具，這項(xiàng)技術(shù)在不斷進(jìn)步。流式細(xì)胞儀的多參數(shù)細(xì)胞分析這一*的功能讓大多數(shù)細(xì)胞分析成為了可能。Coon首先提出了熒光抗體標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的目的蛋白技術(shù)，在20世紀(jì)80年代，細(xì)胞亞群僅僅通過檢測單一的細(xì)胞表面標(biāo)志物來確定，使用的單抗和熒光素很受限制。基因表達(dá)技術(shù)的誕生和新的單抗以及熒光素的獲得使更復(fù)雜的多參數(shù)分析成為可能。

　　??1. 常用熒光素的種類及特性

　　??1). FITC(Fluorescein)又稱異硫氰酸熒光素，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;FITC 的大發(fā)射波長為525nm，在流式細(xì)胞儀的FL1通道檢測。

　　??2). PE(R-Phycoerythrin)又稱藻紅蛋白，有R-PE和RD1的別稱，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;PE 的大發(fā)射波長為575nm，在流式細(xì)胞儀的FL2通道檢測。

　　??3). PE-TR(PE-TexasRed)/ECDPE-TR又名ECD，是由PE和TexasRed(TR)組合而成的Tandem熒光素;其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;PE-TR的大發(fā)射波長為 615nm，在流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測;PE-TR標(biāo)記的抗體可用于毫瓦級激光器的小流式細(xì)胞儀，也適用于配備有全功率激光器的大流式分選儀。

　　??4). PI(PropidiumIodide)又稱碘化丙啶，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;PI的大發(fā)射波長為617nm。在流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測。

　　??5). PE-Cy5(TRI-COLOR，TC)又稱TRI-COLOR或TC，是由PE和Cy5組合而成的Tandem熒光素;其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;PE-Cy5 的大發(fā)射波長為670nm，在流式細(xì)胞儀上用FL3通道檢測;PE-Cy5 標(biāo)記的抗體可用于毫瓦級激光器的小流式細(xì)胞儀，也適用于配備有全功率激光器的大流式分選儀。

　　??6). PerCP(Peridinin-Chlorophyll-ProteinComplex)多甲藻黃素-葉綠素-蛋白質(zhì)復(fù)合物，其標(biāo)記的抗體適用于所有配備488nm氬離子激光器的流式細(xì)胞儀;PerCP的大發(fā)射波長為677nm。在流式細(xì)胞儀的FL3通道檢測。

　　??7). APC(Allophycocyanin)又稱別藻藍(lán)蛋白，其標(biāo)記的抗體適用于配備氦氖激光器發(fā)射波長為633nm的多色流式細(xì)胞儀;APC大發(fā)射波長為660nm，在流式細(xì)胞儀中只有配有雙激光器的FL4才能檢測。

　　??8). APC-Cy7是由APC 和Cy7組合而成的Tandem熒光素;其標(biāo)記的抗體適用于配備氦氖激光器發(fā)射波長為633nm的多色流式細(xì)胞儀，APC-Cy7主要用于四色以上的流式細(xì)胞術(shù)。

　　??2. 常見熒光素?zé)晒鈴?qiáng)度比較

　　??熒光的強(qiáng)度與染色指數(shù)(Stain Index)有關(guān)，染色指數(shù)的計(jì)算：Stain Index=D/W，染色指數(shù)越高，熒光強(qiáng)度越好;染色指數(shù)較低，染色強(qiáng)度相對較差：

　　??3. 多色流式細(xì)胞檢測中熒光素選擇的原則

　　??根據(jù)機(jī)器配置選擇熒光素

　　??比如 BD calibour 流式儀，配置有兩色激光，能夠做 4 個(gè)通道的熒光素，需根據(jù)對應(yīng)的激光激發(fā)波長和檢測通道選擇合適的熒光抗體

　　??多色標(biāo)記熒光素搭配原則：每個(gè)通道只能選擇一種熒光素;各個(gè)通道之間的熒光素可以隨意搭配。FACSCalibur 常用的四色搭配：FITC, PE, PerCP, APC

　　??多色流式實(shí)驗(yàn)熒光素?古朵一直視質(zhì)量控制為企業(yè)的生命，追求企業(yè)競爭力的不斷提升。公司始終秉承信譽(yù)為生存之本的宗旨，以過硬的質(zhì)量和優(yōu)良的服務(wù)來維護(hù)和拓展市場，較大限度的滿足客戶的需求。與客戶的共贏，是我們的發(fā)展目標(biāo)。古朵!您信任的合作伙伴。我們愿與您真誠合作，共創(chuàng)美好的未來。