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古朵高速您如何正確的進(jìn)行細(xì)胞傳代呢?
適應(yīng)在體外培養(yǎng)條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細(xì)胞稱為傳代細(xì)胞。幼年動(dòng)物的腎、肺、肝、卵巢、上皮、肌肉與腫瘤等組織的細(xì)胞較易培養(yǎng),而神經(jīng)細(xì)胞則較難培養(yǎng)。原代細(xì)胞基礎(chǔ)上通過(guò)等物質(zhì)消化后繼續(xù)用于細(xì)胞培養(yǎng)的細(xì)胞,它與原代細(xì)胞具有相同核型。這類細(xì)胞在體外可以無(wú)限制分裂.下面古朵生物小編就講一下細(xì)胞傳代的方法以及步驟:
1.【無(wú)菌環(huán)境】
在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)之前要注意無(wú)菌環(huán)境的建立,紫外殺毒滅菌,酒精消毒都是十分有必要的。
2.【鏡下檢查】
鏡下檢查結(jié)果非常重要,鏡檢的結(jié)果非常重要,要根據(jù)你自己的觀察進(jìn)行細(xì)胞密度的識(shí)別,從而進(jìn)行細(xì)胞傳代比例的確定,進(jìn)行更好的細(xì)胞數(shù)量的控制,如果實(shí)驗(yàn)要求比較高,需要細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
3.【過(guò)火焰】
記住,所有開(kāi)瓶的東西都要進(jìn)行過(guò)酒精燈外焰,瞬間高溫進(jìn)行灰塵的固定。這樣會(huì)大大減少染菌幾率。
4.【移液工具】
很多人對(duì)于移液工具都有偏好,不好說(shuō)什么就是正確的。但是從無(wú)菌角度。使用移液管比微量移液槍減少污染的幾率要高。希望大家能用移液管。
5.【交叉污染】
混勻細(xì)胞懸液和移取培養(yǎng)基以及血清的工具要分開(kāi);還有就是胰mei和血清也要嚴(yán)格分開(kāi),否則容易造成交叉感染,使細(xì)胞增加染菌幾率。
6.【消化時(shí)間】
對(duì)于貼壁細(xì)胞,我想要大家注意的是胰mei消化時(shí)間,對(duì)于常用0.25%的胰mei最好把消化時(shí)間控制在30s內(nèi),必要是最好鏡檢看一下是否脫壁。但是這是一個(gè)經(jīng)驗(yàn)活,要多積累經(jīng)驗(yàn)。
7.【細(xì)胞混勻】
細(xì)胞的混勻要輕柔,氣泡的產(chǎn)生對(duì)細(xì)胞的狀態(tài)是有影響的,希望大家注意。另外,貼壁細(xì)胞容易粘連,所以要多吹打幾次。
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