實(shí)驗(yàn)概要：了解合成培養(yǎng)基、半合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基的配制原理。學(xué)習(xí)和掌握麥芽汁培養(yǎng)基、馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基的配制方法。

實(shí)驗(yàn)原理：
麥芽汁培養(yǎng)基和馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基被廣泛用于培養(yǎng)酵母菌和霉菌。馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基有時(shí)也可用于培養(yǎng)放線菌。豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基也是培養(yǎng)酵母菌及霉菌的一種優(yōu)良培養(yǎng)基。察氏培養(yǎng)基主要用于培養(yǎng)霉菌觀察形態(tài)用。麥芽汁培養(yǎng)基為天然培養(yǎng)基，馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基和豆芽汁葡萄糖培養(yǎng)基二者均為半合成培養(yǎng)基，而察氏培養(yǎng)基則為合成培養(yǎng)基。培養(yǎng)基配方中出現(xiàn)的自然pH系指培養(yǎng)基不經(jīng)酸、堿調(diào)節(jié)而自然呈現(xiàn)的pH。

主要試劑
1. 葡萄糖
2. 蔗糖
3. NaN03
4. K2HP04
5. KCl
6. MgSO4·7H2O
7. FeS04
8. 瓊脂
9. 新鮮麥芽汁、黃豆芽、馬鈴薯等

主要設(shè)備
1. 儀器：天平、高壓蒸汽滅菌鍋。
2. 玻璃器皿：移液管、試管、錐形瓶、燒杯、量筒、培養(yǎng)皿、玻璃漏斗等。
3. 其他物品：藥匙、pH試紙、稱量紙、記號(hào)筆、棉花、紗布、線繩、塑料試管蓋、牛皮紙、報(bào)紙等。

實(shí)驗(yàn)步驟
1. 麥芽汁培養(yǎng)基的配制
   1) 培養(yǎng)基成分  
新鮮麥芽汁一般為10-15波林。
   2) 配制方法   
      a. 用水將大麥或小麥洗凈，用水浸泡6-12h，置于15℃陰涼處發(fā)芽，上蓋紗布，每日早、中、晚淋水一次，待麥芽伸長(zhǎng)至麥粒的兩倍時(shí)，讓其停止發(fā)芽，曬干或烘干，研磨成麥芽粉，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
      b. 取一份麥芽粉加四份水，在65℃水浴鍋中保溫3-4h，使其自行糖化，直至糖化*(檢查方法是取0.5ml的糖化液，加2滴dian液，如無藍(lán)色出現(xiàn)，即表示糖化*)。   
      c. 糖化液用4-6層紗布過濾，濾液如仍混濁，可用雞蛋清澄清(用一個(gè)雞蛋清，加水20 ml，調(diào)勻至生泡沫，倒入糖化液中，攪拌煮沸，再過濾)。   
      d. 用波美比重計(jì)檢測(cè)糖化液中糖濃度，將濾液用水稀釋到10-15波林，調(diào)pH至6.4。如當(dāng)?shù)赜衅【茝S，可用未經(jīng)發(fā)酵，未加酒花的新鮮麥芽汁，加水稀釋到10-15波林后使用。   
      e. 如配固體麥芽汁培養(yǎng)基時(shí)，加入2％瓊脂，加熱融化，補(bǔ)充失水。   
      f. 分裝、加塞、包扎。   
     g. 高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

2. 馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基的配制
   1) 培養(yǎng)基成分  
馬鈴薯 20g  
葡萄糖 2 g  
瓊脂 1.5-2g  
水 100ml  
自然pH
   2) 配制方法
      a. 配制20％馬鈴薯浸汁  取去皮馬鈴薯200g，切成小塊，加水1000ml。80℃浸泡lh，用紗布過濾，然后補(bǔ)足失水至所需體積。100 Pa滅菌20 min。即成20％馬鈴薯浸汁，貯存?zhèn)溆谩?nbsp;  
      b. 配制時(shí)，按每100 ml馬鈴薯浸汁加入2g葡萄糖，加熱煮沸后加入2g瓊脂，繼續(xù)加熱融化并補(bǔ)足失水。   
      c. 分裝、加塞、包扎。   
      d. 高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

3. 豆芽汁葡萄糟培養(yǎng)基的配制  
   1) 培養(yǎng)基成分   
黃豆芽 10g  
葡萄糖 5g  
瓊脂 1.5-2g  
水 100ml  
自然pH
   2) 配制方法
      a. 稱新鮮黃豆芽10g，置于燒杯中，再加入100 ml水，小火煮沸30 min，用紗布過濾，補(bǔ)足失水，即制成10％豆芽汁。  
      b. 配制時(shí)，按每100 ml10％豆芽汁加入5g葡萄糖，煮沸后加入2 g瓊脂，繼續(xù)加熱融化，補(bǔ)足失水。   
      c. 分裝、加塞、包扎。   
      d. 高壓蒸汽滅菌  100 Pa滅菌20 min。

4. 察氏(czapck)培養(yǎng)基的配制
   1) 培養(yǎng)基成分  
蔗糖 3g  
NaN03 0.3g  
K2HP04  0.1g  
KCl 0.05g  
MgSO4·7H2O    0.05 g  
FeS04 0.001 g  
瓊脂 1.5-2g  
蒸餾水 100ml  
自然pH    
    2) 配制方法
      a. 稱量及溶化  量取所需水量約2／3左右加入到燒杯中，分別稱取蔗糖、NaNO3 、K2HP04 、KCl、MgSO4。依次逐一加入水中溶解。按每100 ml培養(yǎng)基加入1ml 0.1％的FeS04溶液。  
      b. 定容  候藥品全部溶解后，將溶液倒入量筒中，加水至所需體積。  
      c. 加瓊脂  加入所需量瓊脂，加熱融化，補(bǔ)足失水。  
      d. 分裝、加塞、包扎。  
      e. 高壓蒸汽滅菌 100 Pa滅菌20 min。