阿爾新藍(lán)-核固紅染色試劑盒(pH1.0)

　　阿爾新藍(lán)-核固紅染色試劑盒(pH1.0) (Alcian Blue & Nuclear Fast Red Staining Kit, pH1.0)是一種通過(guò)阿爾新藍(lán)對(duì)含有硫酸根(sulfated)的組織如硫酸化黏液物質(zhì)或強(qiáng)硫酸化黏液物質(zhì)(strongly sulfated mucosubstances)等進(jìn)行染色的試劑盒，同時(shí)提供核固紅進(jìn)行復(fù)染。本產(chǎn)品對(duì)不同組織的石蠟切片和冰凍切片均適用，也可用于血涂片和骨髓涂片的染色。

　　本試劑盒染色時(shí)無(wú)須額外的酸化操作步驟，染色步驟更加簡(jiǎn)單便捷。

　　阿爾新藍(lán)(Alcian Blue)，也稱(chēng)阿爾新藍(lán)8G、阿利新藍(lán)或愛(ài)先藍(lán)，是一種類(lèi)銅鈦花青共軛染料，最初用于紡織纖維染色。阿爾新藍(lán)的分子式為 C56H68N16S4Cl4Cu，分子量為1298.86，CAS號(hào)為33864-99-2，墨綠色結(jié)晶，有金屬光澤，溶于水。阿爾新藍(lán)屬于陽(yáng)離子染料，中央含銅的酞菁環(huán)與四個(gè)異硫脲基通過(guò)硫醚鍵相連而成，異硫脲基呈中度堿性，使阿爾新藍(lán)帶陽(yáng)離子。阿爾新藍(lán)使酸性物質(zhì)著色的機(jī)制尚不十分明確，一般認(rèn)為是陽(yáng)離子的異硫脲基通過(guò)靜電與組織內(nèi)的多聚陰離子如酸性黏液物質(zhì)的羧基或硫酸根形成不溶性復(fù)合物，即染料分子中帶正電荷的鹽鍵和酸性黏液物質(zhì)中帶負(fù)電荷的酸性基團(tuán)結(jié)合呈藍(lán)色。

　　阿爾新藍(lán)是顯示酸性黏性物質(zhì)最特異的染料，所以阿爾新藍(lán)染色又可以稱(chēng)為粘蛋白染色(mucin stain)。阿爾新藍(lán)染料與酸性黏液物質(zhì)中酸性基團(tuán)形成鹽鍵，利用染料的不同pH值，可區(qū)分酸性黏液物質(zhì)的類(lèi)別：當(dāng)阿爾新藍(lán)染色液的pH值為1.0時(shí)，使含有硫酸根(sulfated)的組織如酸性硫酸化或強(qiáng)硫酸化黏液物質(zhì)染成藍(lán)色，而不能染色含有羧基的組織;當(dāng)阿爾新藍(lán)染色液的pH值為2.5時(shí)，也可以使結(jié)締組織或軟骨中含有羧基(carboxylated)的組織如唾液粘多糖蛋白(sialomucins)、透明質(zhì)酸(hyaluronic acid)及上皮酸性黏蛋白(epithelial acid mucin)等染為藍(lán)色，但對(duì)于含有硫酸根的組織，pH2.5的染色要弱于pH1.0;中性黏蛋白如胃黏膜和Brunner腺體部位的中性黏蛋白等不能與阿爾新藍(lán)反應(yīng)。核固紅染色液復(fù)染可使核染成粉紅色或紅色。阿爾新藍(lán)-核固紅染色試劑盒(pH1.0)染色后酸性黏性物質(zhì)和細(xì)胞核的顏色見(jiàn)下表：

　　SamplesColor

　　硫酸化黏液物質(zhì)(Sulfated Mucosubstances)Blue

　　細(xì)胞核(Nuclei)Red

　　背景(Background)Pink

　　本試劑盒染色靈敏度高，背景低，著色清晰分明，用于小鼠小腸組織染色效果參考圖1。

　　本試劑盒C0153S和C0153M用于切片的染色，每個(gè)切片樣品各使用100μl染色液，可以分別進(jìn)行100次和500次染色。

　　包裝清單：

　　產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)包裝

　　C0153S-1阿爾新藍(lán)染色液(pH1.0)10ml

　　C0153S-2核固紅染色液10ml

　　—說(shuō)明書(shū)1份

　　產(chǎn)品編號(hào)產(chǎn)品名稱(chēng)包裝

　　C0153M-1阿爾新藍(lán)染色液(pH1.0)50ml

　　C0153M-2核固紅染色液50ml

　　—說(shuō)明書(shū)1份

　　保存條件：

　　室溫避光保存，一年有效。長(zhǎng)期不使用可以4℃或-20℃保存。

　　注意事項(xiàng)：

　　第一次使用本試劑盒時(shí)建議先取1-2個(gè)樣品進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)，摸索染色適宜的條件。

　　染色過(guò)程應(yīng)在濕盒中進(jìn)行，防止染液風(fēng)干。

　　核固紅復(fù)染的過(guò)程推薦淺染，通常能夠分辨細(xì)胞核即可，顏色過(guò)深有可能影響細(xì)胞觀察。

　　應(yīng)根據(jù)不同的組織類(lèi)型選取pH1.0或pH2.5的阿爾新藍(lán)-核固紅染色試劑盒;對(duì)于不同的組織，染色時(shí)間也不相同。

　　本試劑盒中的阿爾新藍(lán)染色液已配制在酸性溶液中，無(wú)須再進(jìn)行額外的酸化處理。

　　如果阿爾新藍(lán)染色液出現(xiàn)沉淀，請(qǐng)勿使用。

　　誤放入冰箱等低溫條件下，核固紅染色液會(huì)出現(xiàn)析出物。此時(shí)可以25-50℃水浴加熱，充分溶解并混勻后使用。

　　本產(chǎn)品僅限于專(zhuān)業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。

　　為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

　　1.樣品處理：

　　a.對(duì)于石蠟切片。

　　石蠟切片的制備：按照常規(guī)方法進(jìn)行取材、固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片、烘片等步驟制備石蠟切片。

　　二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

　　換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

　　無(wú)水乙醇5分鐘。

　　90%乙醇2分鐘。

　　80%乙醇2分鐘。

　　70%乙醇2分鐘。

　　b.對(duì)于冰凍切片：

　　冰凍切片的制備：按照常規(guī)方法進(jìn)行取材、速凍、切片、烘片等步驟制備冰凍切片。

　　蒸餾水洗滌2分鐘。

　　c.對(duì)于血涂片、骨髓涂片：

　　晾干即可。

　　2.阿爾新藍(lán)染色液染色。

　　a.對(duì)于石蠟切片和冰凍切片：

　　(a)每個(gè)切片滴加50-100μl阿爾新藍(lán)染色液(pH1.0)，置于濕盒中染色1小時(shí)，去除染液。蒸餾水洗滌3次，每次10秒。

　　(b)每個(gè)切片滴加50-100µl核固紅染色液，染色5-10分鐘，去除染液，自來(lái)水洗滌5分鐘。

　　(c)切片依次浸入70%乙醇10秒，80%乙醇10秒，90%乙醇10秒，無(wú)水乙醇10秒，然后使用二甲苯透明1分鐘，中性樹(shù)脂封片。

　　(d)在顯微鏡下觀察和拍照。

　　b.對(duì)于血涂片、骨髓涂片：

　　(a)每個(gè)切片滴加50-100μl阿爾新藍(lán)染色液(pH1.0)，置于濕盒中染色1小時(shí)，去除染液。蒸餾水洗滌3次，每次10秒。

　　(b)每個(gè)切片滴加50-100µl核固紅染色液，染色5-10分鐘，去除染液，自來(lái)水洗滌5分鐘。

　　(c)晾干后在顯微鏡下觀察和拍照。

　　注：染色過(guò)深或過(guò)淺應(yīng)調(diào)整染色時(shí)間。

　　改良吉姆薩染色液上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專(zhuān)門(mén)從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵(lì)志研發(fā)和銷(xiāo)售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷(xiāo)多個(gè)國(guó)家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹(shù)立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向，不斷開(kāi)發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒