ELISA試劑盒 問題大全

　　問題：如果試劑的體積很小，我該怎么辦?

　　回答：如果試劑的體積很小，請?jiān)谑褂们皩⒃噭┢侩x心，以確保試劑集中于瓶底。

　　問題：不按的方法保存試劑可以嗎?

　　回答：不推薦，否則試劑的質(zhì)量無法保證。

　　問題：可以將不同批號或試劑盒內(nèi)的同一試劑混用嗎?

　　回答：不可以。

　　問題：在包被板使用前必須洗嗎?

　　回答：不是必須，但推薦使用，因?yàn)槿绻÷源瞬襟E精確度可能會降低。

　　問題：孵育時(shí)間延長或縮短可以嗎?

　　回答：孵育時(shí)間必須嚴(yán)格按照說明書操作，才能得到最佳的結(jié)果。

　　問題：實(shí)驗(yàn)必須重復(fù)一次嗎?

　　回答：不必須，但對于每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品建議做復(fù)孔。

　　問題：貴公司的ELISA試劑盒可以檢測哪些類型的標(biāo)本?

　　回答：我們的大多數(shù)ELISA試劑盒均適用于人的血清，血漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它體液。在產(chǎn)品說明書和我們的目錄上您會看到具體的適用范圍。

　　問題：背景色過高是什么原因?

　　回答：造成背景色過高主要有以下幾點(diǎn)原因：

　　1)不正確的洗滌

　　洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會導(dǎo)致背景色過高。

　　解決方法：檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟;確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

　　2)底物污染

　　確保在使用前，底物不被金屬離子或氧化劑污染;

　　在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物

　　底物本身不應(yīng)該有顏色

　　3)稀釋液污染

　　我們的大多數(shù)稀釋液均含有蛋白，在開瓶時(shí)可能會造成污染。在從瓶中取液體時(shí)一定要用 “滅菌" 的槍頭

　　4) 底物曝光

　　底物曝光會使底物變成蘭色，因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶內(nèi))

　　5) 偶合物的錯(cuò)誤稀釋

　　偶合物濃度過高會造成高背景色，因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書稀釋

　　6) 錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度

　　必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書來確定孵育時(shí)間和溫度

　　7) 包被板保存不當(dāng)

　　如果包被板只用了一部分，一定要正確保存剩余的板條。

　　問題：測試內(nèi)CV(變異系數(shù))過高是什么原因?

　　回答：造成測試內(nèi)CV(變異系數(shù))過高主要有以下幾點(diǎn)原因：

　　1)在洗滌或吸取移液時(shí)，刮擦到板孔內(nèi)部引起包被的抗體脫落,注意在洗滌包被板或吸移標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)不要刮擦到板孔內(nèi)表面。

　　2)在剝除包被板覆蓋物時(shí)造成孔與孔間的交叉污染

　　在每次孵育完成時(shí)，一定要小心地剝除包被板覆蓋物，以免孔與孔間的交叉污染。

　　3)樣品不均一

　　確保所測試樣品是均一的，在加入包被板前要混勻

　　4)邊緣效應(yīng)

　　在孵育時(shí)要封好包被板，并盡可能在100 rpm的振蕩器上孵育。

　　5)移液器沒有正確校準(zhǔn)

　　6)在實(shí)驗(yàn)時(shí)，要確保移液器經(jīng)過正確校準(zhǔn)

　　問題：標(biāo)準(zhǔn)曲線不對是什么原因?

　　回答：造成標(biāo)準(zhǔn)曲線不主要有以下幾點(diǎn)原因：

　　1)凍干標(biāo)準(zhǔn)品重懸不正確

　　確保凍干標(biāo)準(zhǔn)品重懸在正確的液體中，并以正確的體積重懸。重懸體積在說明書和試劑瓶的標(biāo)簽上均有表明

　　2)重懸時(shí)間過短

　　確保足夠的時(shí)間，以溶解凍干標(biāo)準(zhǔn)品

　　3)濃縮貯存標(biāo)準(zhǔn)品的不正確稀釋

　　濃縮貯存標(biāo)準(zhǔn)品要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說明書正確稀釋

　　4)貯存標(biāo)準(zhǔn)品/預(yù)稀釋液的不正確保存

　　在說明書已注明貯存標(biāo)準(zhǔn)品和預(yù)稀釋液的保存條件，一定要嚴(yán)格按照說明書操作。

　　5)標(biāo)準(zhǔn)品污染

　　使用無菌槍頭，保存方法正確可以防止標(biāo)準(zhǔn)品的污染。

　　6)標(biāo)準(zhǔn)品稀釋時(shí)沒有正確混勻

　　在系列稀釋標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)，要保證每步稀釋時(shí)均正確混勻。

　　7)檢測波長不正確

　　要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。

　　8)使用其它批號的標(biāo)準(zhǔn)品

　　只能使用同一試劑盒內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品，不可以使用其它批號/試劑盒中的標(biāo)準(zhǔn)品。

　　問題：不顯色是什么原因?

　　回答：造成不顯色主要有以下幾點(diǎn)原因：

　　1)測試前未將試劑恢復(fù)至室溫

　　在實(shí)驗(yàn)開始前要將所有試劑恢復(fù)至室溫。

　　2)某些試劑的不正確保存

　　所有試劑的保存方法在說明書中均有詳述，要嚴(yán)格依其操作。

　　3)HRP偶合試劑的污染

　　在此試劑用前一定要確保無污染。

　　4)HRP偶合試劑的不正確稀釋

　　如果HRP偶合試劑濃縮液過度稀釋，則顯色變?nèi)?，要按說明書操作。

　　5)2組分TMB的不正確混合

　　按說明書所示比例混合TMB底物，并保證正確混勻

　　6)省略孵育步驟

　　說明書中任何一步孵育步驟均不可省略。

　　7)洗滌后或儲存時(shí)，板孔干燥

　　洗滌后，在吸水紙上拍打板條以去除多余的洗滌緩沖液，之后要立即進(jìn)行后面的操作步驟或倒口在吸水紙上不超過15分鐘，以免板孔干燥。

　　8)在洗滌或吸取移液時(shí)，刮擦到板孔內(nèi)部引起包被的抗體脫落

　　注意在洗滌包被板或吸移標(biāo)準(zhǔn)品和樣品時(shí)不要刮擦到板孔內(nèi)表面。

　　9)樣品不適合此檢測

　　在說明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索(如調(diào)節(jié)稀釋度等)

　　問題：樣品或標(biāo)準(zhǔn)品 “溢值" 是什么原因?

　　回答：造成樣品或標(biāo)準(zhǔn)品 “溢值" 主要有以下幾點(diǎn)原因：

　　1)樣品/標(biāo)準(zhǔn)品不正確稀釋

　　要嚴(yán)格按照說明書來稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

　　2)偶合試劑不正確稀釋

　　要嚴(yán)格按照說明書來稀釋偶合試劑，濃度過高會造成OD的 “溢值" HRP偶合試劑的不正確稀釋

　　3)所用稀釋液不對

　　只能使用相應(yīng)試劑盒內(nèi)的稀釋液稀釋樣品和標(biāo)準(zhǔn)品。

　　4)檢測波長不正確

　　要保證分光光度劑的檢測波長是正確的。

　　5)TMB底物的顯色時(shí)間過長

　　請監(jiān)控顯色時(shí)間。說明書中所示的顯色時(shí)間可能因?yàn)闇囟群推渌鼨z測條件的不同而稍有變化。

　　6)樣品不適合此檢測

　　在說明書中會列出每種產(chǎn)品的適用標(biāo)本范圍，超出范圍的標(biāo)本可能不適于此試劑盒或者檢測條件需要摸索(如調(diào)節(jié)稀釋度等)

　　7)樣品/標(biāo)準(zhǔn)品污染

　　樣品或標(biāo)準(zhǔn)品的污染可能會導(dǎo)致檢測結(jié)果 “溢值"。

　　8)孵育時(shí)間/溫度不正確

　　要嚴(yán)格按照說明書來確定孵育時(shí)間和溫度。

　　9)在孵育時(shí)為蓋上酶聯(lián)板覆蓋物

　　在孵育時(shí)需蓋上酶聯(lián)板覆蓋物，以防止液體蒸發(fā)或孵育期間的污染。每個(gè)試劑盒內(nèi)均有足夠數(shù)量的酶聯(lián)板覆蓋物

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。古朵試劑盒