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古朵生物:ELISA“花板"原因總結(jié)
為了避免“花板"問題的出現(xiàn),降低檢測的假陽性率,獲得更理想的實驗結(jié)果,在檢測過程中應(yīng)采取下列措施:
1.在選擇ELISA試劑時,應(yīng)選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、操作方便、省時的試劑。
2.在所有標本進行檢測的過程中,所用的儀器及加樣過程都處于正常狀態(tài)的情況下,步要均按照各種試劑說明書的要求去做,排除實驗所用儀器和操作步驟對實驗結(jié)果的影響。
3.血液標本應(yīng)置于室溫下1-24,使血液緊固收縮,然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮,讓標本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至低。
4.檢測之前,加大離心轉(zhuǎn)速,盡量延長時間,使血細胞和纖維蛋白東分沉淀,讓血細胞與血清分離
5.加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白,要按照操作說明書去做,否則會影響實驗結(jié)果.
6.對于血清中存在的紅細胞或纖維蛋白原,可以在加樣前離心時得到控制,同樣也可以通過適當增加洗濟次數(shù)和浸泡時間來進一步減輕或避免對實驗結(jié)果的影響。同樣,對于血液存在的非特異性的IgG,增加洗滌次數(shù)和延長浸泡時間也同樣有效。
7.封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致"花板"的出現(xiàn)
8.孵育時間過長,增加了固相載體吸附非特異性蛋白的可能性,也會造成“花板"。因此,除把握解育時間5在加樣過程中也應(yīng)嚴格控制時間,標本較多時可分批提作。
9.手工洗板時應(yīng)注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出,連成整體液面后產(chǎn)生“花板"
10.用洗板機洗板時應(yīng)防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)急而導(dǎo)致"花板的出現(xiàn)。
11.洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度,尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板"問題。
12.洗液要注滿孔,孔壁洗滌不干凈也易造成"花板"現(xiàn)象。
13.洗液要盡量新鮮配制,放置時間過長易產(chǎn)生絮狀物或渾濁,造成堵孔或花板
14.有些廠家的試劑顯色液不穩(wěn)定,使用前容易變藍,如在實驗前不仔細檢查,很容易導(dǎo)致 花板"現(xiàn)象的發(fā)生,這也提醒實驗者應(yīng)使用新鮮的顯色液,保證實驗的準確性,
Elisa試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。
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