古朵教您ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)過(guò)程血清為何要稀釋?

　　每一盒ELISA試劑盒里面都有一份對(duì)應(yīng)的說(shuō)明書(shū)，而每一份說(shuō)明書(shū)里都會(huì)有寫(xiě)樣本和稀釋液的稀釋份額，為何樣本都需求稀釋呢?今日的文章中，古朵生物公司將為您剖析：為何ELISA實(shí)驗(yàn)血清樣本都需求稀釋?

　　在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)血清為何要稀釋?有兩個(gè)原因：

　　1.比賽按捺對(duì)比明顯，應(yīng)稀釋比賽物;

　　2.以下降非特異性反應(yīng)，使特異性的抗原抗體反應(yīng)充分體現(xiàn)出來(lái)。

　　血清稀釋用一般的PBS即可，可加1%的BSA，能有用下降ELISA本底，當(dāng)然假如你嫌費(fèi)事我覺(jué)得用生理鹽水代替PBS也不大。不管你是用直接比賽仍是直接比賽，血清的稀釋倍數(shù)必定要事前確認(rèn)，但也不必一點(diǎn)點(diǎn)，你做一個(gè)預(yù)實(shí)驗(yàn)即可，挑選OD在1.0左右的稀釋倍數(shù)，即你的ELISA中陰性孔OD在1.0，這么作出來(lái)的曲線對(duì)比靈敏。

　　ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)稀釋血清的過(guò)程：

　　1、先把蛋白稀釋一定的倍數(shù)，比如說(shuō)10倍、20倍稀釋(這樣可以大體確認(rèn)一個(gè)參數(shù))，將抗原進(jìn)行一系列稀釋包被微量反應(yīng)板

　　2、再用一定稀釋度的陽(yáng)性參閱血清和陰性參閱血清進(jìn)行孵育后洗刷，再加酶結(jié)合物進(jìn)行反應(yīng)，經(jīng)孵育洗刷后，加底物溶液顯色，停止反應(yīng)后分別測(cè)定O.D值，挑選O.D值≥1.0的那個(gè)抗原稀釋度為zui適包被濃度。一般總是要挑選那個(gè)O.D值稍大于1.0，而不挑選小于1.0的抗原濃度。陰性參閱血清O.D值要求<0.1-0.2。也便是要求陽(yáng)性參閱血清和陰性參閱血清的O.D值有明顯差別。

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