古朵教您如何避免ELISA實驗中的基質(zhì)效應(yīng)?

　　在ELISA試劑盒實驗的時候，我們經(jīng)常會遇到樣品濃度挨近試劑盒的靈敏度，容易發(fā)生樣本OD450值低于空白值的現(xiàn)象，特別是在血清和血漿樣本中。這就有可能是基質(zhì)效應(yīng)導致的結(jié)果。

　　什么是基質(zhì)效應(yīng)呢?

　　首先我們要知道什么是基質(zhì)，基質(zhì)是指樣品中目標分析物以外的部分。由于基質(zhì)成分會對分析過程有顯著干擾，影響分析結(jié)果的準確性。業(yè)內(nèi)把這些影響統(tǒng)稱為基質(zhì)效應(yīng)。這是ELISA試劑盒開發(fā)和使用中需要避開的雷。

　　如何判斷是否是基質(zhì)效應(yīng)呢?

　　當單個樣本或少量樣本值低于空白值時，可能是實驗操作出現(xiàn)問題，這時應(yīng)增加重復，進步操作技術(shù)。當許多樣本都低于空白值時，應(yīng)思考基質(zhì)效應(yīng)的影響，建立校正曲線予以修改?；|(zhì)效應(yīng)的原因錯綜復雜，有可能是樣品中存在的基質(zhì)導致原抗體的聯(lián)絡(luò)結(jié)合能力下降，便產(chǎn)生了樣本值低于空白值的現(xiàn)象。導致樣本值無法計算出數(shù)值，或許數(shù)值為負。

　　雖然原因復雜，但有方法可以用來評估基質(zhì)效應(yīng)。

　　第一種方法是采用線性稀釋，一般來講，抗原和捕獲抗體、檢測抗體之間的結(jié)合作用很強，樣品濃度被稀釋并不影響它們的結(jié)合，而造成基質(zhì)效應(yīng)的非特異結(jié)合的力要弱很多，如果不斷稀釋樣品，非特異結(jié)合造成的干擾會逐步減少，測量值也更接近真實值。沒有基質(zhì)效應(yīng)時，無論如何稀釋，測量值都和真實值吻合。而有基質(zhì)效應(yīng)時，稀釋會造成非特異性結(jié)合比例的減少，測量值也相應(yīng)地產(chǎn)生很大改變。

　　第二種方法是摻入回收率實驗，將低、中和高濃度的分析物摻入到已測定過濃度的樣本中，摻入前后實測到的濃度增加部分與摻入濃度之比就是回收率，回收率以百分比的形式呈現(xiàn)?；厥章式橛?0-120%，才符合標準。

　　那我們?nèi)绾伪苊釫LISA試劑盒實驗中基質(zhì)效應(yīng)?

　　基質(zhì)效應(yīng)可以通過產(chǎn)品研發(fā)階段的優(yōu)化盡可能去消除的。

　　ELISA試劑盒 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。