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上海古朵生物科技有限公司

實(shí)驗(yàn)步驟:BCA法-總蛋白操作原理步驟

時(shí)間:2023-8-2閱讀:551
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  BCA法-總蛋白操作原理步驟


  操作原理:

  原理BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(BCA Protein Assay Kit)是根據(jù)目前常用蛋白濃度檢測(cè)方法之一BCA法研制而成,實(shí)現(xiàn)了蛋白濃度測(cè)定的簡(jiǎn)單,高穩(wěn)定性,高靈敏度和高兼容性.檢測(cè)濃度下限達(dá)到25微克1毫升,最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5微克,待測(cè)樣品體積為120微升。

  BCA法-總蛋白以下操作步驟

  一.標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:各管 按照下表加入試劑孔號(hào)01234567蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液( μL) 05 10 2040 6080 100去離子水( uL) 100 95 90 80 604020 0對(duì)應(yīng)蛋白含量( μg) 02.55.10.0 20.0 30.0 40.0 50.0

  二.根據(jù)樣品數(shù)量,按50體積BCA試劑A加1體積BCA試劑B ( 50:1)配制適量BCA工作液,充分混勻:

  三.各管充分混勻,37C放置 30分鐘,然后在562nm下比色測(cè)定。以蛋白含量( μg)為橫坐標(biāo),吸光值為縱坐標(biāo),繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線:

  四.稀釋待測(cè)樣品至合適濃度,樣品稀釋液總體積為100 ul,加入bca工作液1000μL,充分混勻,37C放置 30分鐘后,以標(biāo)準(zhǔn)曲線0號(hào)管做參比,在562nm波長(zhǎng)下比色,記錄吸光值

  BCA法-總蛋白先按說明書清點(diǎn)試劑盒里的試劑和物品,然后進(jìn)行標(biāo)曲稀釋和BCA工作液的配制,之后以血清樣本為例,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。整個(gè)過程包括標(biāo)曲稀釋,試劑準(zhǔn)備,樣本準(zhǔn)備,實(shí)驗(yàn)操作,儀器檢測(cè)以及數(shù)據(jù)處理。

  BCA法-總蛋白上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵(lì)志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個(gè)國(guó)家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營(yíng)宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場(chǎng)需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。


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