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古朵生物:ELISA試劑盒實驗步驟及注意事項
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附實驗)試劑盒是一種用于測量蛋白質(zhì)、抗體或其他分子濃度的常用檢測工具。它通常由塑料微孔板和預(yù)涂有特定抗體或蛋白質(zhì)的試劑盒組成,可以方便、快速、準(zhǔn)確地檢測樣品中目標(biāo)物質(zhì)的存在以及其濃度大小。
Elisa試劑盒檢測步驟:
包被抗體:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至適濃度(1~10 ug /ml),每凹孔加0.3 ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時,貯存冰箱。
洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。
稀釋:用包被緩沖液稀釋特異性抗體球蛋白至適濃度(1~10 ug /ml),每凹孔加0.3 ml,4℃過夜,或37℃水浴3小時,貯存冰箱。
洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。
標(biāo)記:加入0.2 ml用稀釋緩沖液稀釋的酶標(biāo)記特異性抗體溶液,37℃作用1~2小時或由預(yù)試實驗確定作用時間。
洗滌:移去包被液,凹孔用洗滌緩沖液(含0.05%吐溫-20)洗3次,每次5分鐘。
包被抗體:加入0.2ml底物溶液于每個凹孔(OPD或OT),室溫作用30分鐘(另作一空白對照,0.4 ml底物加0.1 ml終止劑)。
加終止劑:每凹孔加2M H2SO4或2 M檸檬酸0.05 ml。
觀察記錄結(jié)果:目測或用酶標(biāo)比色計測定(OPD用492nm)OD值。
Elisa試劑盒檢測事項:
ELISA(酶聯(lián)免疫吸附測定)是一種常見的生物化學(xué)檢測方法,用于檢測血清、尿液、唾液等樣本中的特定分子。以下是進(jìn)行ELISA實驗時需要注意的事項:
1.操作時要嚴(yán)格遵守實驗室安全規(guī)定和個人防護(hù)措施。
2.在進(jìn)行試劑盒操作前,應(yīng)按照說明書要求混合或管內(nèi)攪拌試劑。
3.所有試劑和樣品均應(yīng)在4°C下儲存,并在使用前充分恢復(fù)到室溫。
4.對檢測樣品要采用適當(dāng)?shù)南♂尡稊?shù),以防止過高濃度影響結(jié)果準(zhǔn)確性。
5.在加樣時,要避免空氣泡的產(chǎn)生。同時,要記錄好每個微板孔洞的加樣時間、加樣量等信息。
6.在孵育期間應(yīng)保持恒定的溫度和濕度,以及適當(dāng)?shù)恼鹗?如輕微振動),以促進(jìn)反應(yīng)發(fā)生。
7.洗滌步驟必須嚴(yán)格按照說明書要求執(zhí)行,并且每個孔洞必須充分沖洗,
Elisa試劑盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品,勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司,產(chǎn)品遠(yuǎn)銷多個國家和地區(qū),我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準(zhǔn)則、以市場需求為導(dǎo)向,不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品,提供客戶滿意的綜合服務(wù)質(zhì)量"的方針。
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