古朵闡述：雙抗夾心ELISA試劑盒的步驟?

　　(1)單抗包被-抗原-酶標二抗-底物顯色。

　　ELISA試劑盒本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體，經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測樣品，如待檢樣品中有相應抗原存在，即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合，經(jīng)保溫孵育洗滌后，即可加入酶標記特異性抗體，再經(jīng)孵育洗滌后，加底物顯色進行測定，底物降解的量即為欲測抗原的量。

　　(2)單抗包被-抗原-二抗-酶標二抗-底物顯色。(改良雙抗體夾心法)

　　本法首先是將特異性抗體a包被于固相載體，經(jīng)洗滌加入含有欲測抗原之待檢樣品。

　　ELISA試劑盒 經(jīng)孵育洗滌后再加一次未標記的特異性抗體b，

　　而這次加入的抗體b于包被于固相載體上的特異性抗體a對被測抗原來說都是特異性的，

　　但不是用同種動物免疫制備的，否則可出現(xiàn)非特異性反應。

　　經(jīng)孵育洗滌后，再加酶標記抗b抗體，再經(jīng)孵育洗滌后加底物顯色進行測定。

　　這種方法與雙抗體夾心法不同之處是多加了一層抗體。

　　因此，放大的倍數(shù)更高，故比雙抗體夾心法更加靈敏。

　　ELISA試劑盒 同時避免標記特異性抗體，而另一優(yōu)點是只要標記一種抗抗體，即可達到多種應用。

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