實驗原理：石蠟切片免疫組化原理

　　石蠟切片免疫組化原理將樣本固定后包埋到石蠟內(nèi)，將包埋后的組織切片經(jīng)脫蠟處理并微波修復抗原，加3%過氧化氫阻斷組織內(nèi)源性過氧化物酶，一抗特異性結(jié)合目的蛋白，4 ℃孵育過夜后，37 ℃復溫30 min，PBS洗滌干凈后加入二抗孵育35 min(二抗結(jié)合特異一抗)，洗凈后加顯色劑，二抗的標記與顯色劑反應顯色。顯色完成后加蘇木素復染細胞核，1%的鹽酸酒精分化后，水洗返藍再脫水封片，晾干后即可在鏡下觀察組織陽性表達分布。

　　石蠟切片免疫組化操作步驟：

　　1.石蠟切片脫蠟至水：(石蠟切片染色前應置 60℃ 1 小時) 。

　　2.過氧化氫封閉內(nèi)源性過氧化物酶：3%H2 O2 ，室溫 10 分鐘(避光)

　　3.蒸餾水洗：5 分鐘，2 次(置于搖床) 。

　　4.抗原修復：根據(jù)待檢測的抗原，選擇適當?shù)姆椒ā?/p>

　　5.PBS：5 分鐘，2 次(置于搖床) 。

　　6.正常血清封閉：從染片缸中取出切片，擦凈切片背面水分及切片正面組織周圍的水分 (保持組織呈濕潤狀態(tài),)滴加正常山羊或兔血清 (與第二抗 體 同源動物血清)處理，37℃，15 分鐘。

　　7.蘇木素復染，室溫，30 秒，自來水沖洗。

　　8.梯度酒精脫水：80%，2 分鐘 95%，2 分鐘 100%，2 次，5 分鐘。

　　9.二甲苯透明：I ，II (二甲苯)各 5 分鐘

　　10.封片：加拿大樹膠(或中性樹膠)封片

　　石蠟切片免疫組化上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦東新區(qū)。是一家專門從事生物技術(shù)相關(guān)產(chǎn)品，勵志研發(fā)和銷售的綜合性生物公司，產(chǎn)品遠銷多個國家和地區(qū)，我們將一如既往地秉承“一切為了滿足客戶的需求"的經(jīng)營宗旨;牢固樹立“以客戶需求為準則、以市場需求為導向，不斷開發(fā)高質(zhì)量的新產(chǎn)品，提供客戶滿意的綜合服務質(zhì)量"的方針。