古朵課堂：細胞培養(yǎng)的基本條件

　　細胞培養(yǎng)是一種無菌操作技術(shù),要求工作環(huán)境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響.細胞培養(yǎng)室和設(shè)計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環(huán)境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵.細胞培養(yǎng)工作包括:工作液配制、無菌操作(采樣)、溫育、無菌處理,細胞和用品貯存等.細胞培養(yǎng)室的設(shè)計實施原則一般是無菌操作區(qū)設(shè)在室內(nèi)較少走動的內(nèi)側(cè),常規(guī)操作和封閉培養(yǎng)于一室,而洗刷消毒在另一室.

　　一、常用設(shè)施及設(shè)備:

　　(1)超凈工作臺:也稱凈化工作臺,分為側(cè)流式、直流式和外流式三大類.

　　(2)無菌操作間:一般由更衣間、緩部間和操作間三部分組成.操作間放置凈化工作臺及二氧化碳培養(yǎng)箱、離心機、倒置顯微鏡等.緩沖間可放置電冰箱、冷藏器及消毒好的無菌物品等.

　　(3)操作間:普通培養(yǎng)箱、離心機、水浴鍋、定時鐘、普通天平及日常分析處理物品.

　　(4)洗刷消毒間:烤箱、消毒鍋、蒸餾水處理器及酸缸等.

　　(5)分析間:顯微鏡、計算機及打印機等.

　　二、培養(yǎng)器皿:

　　細胞培養(yǎng)以玻璃器皿為主,常準備zui需是使用zui的三倍.器皿應(yīng)選擇透明度好、無毒、中性硬度玻璃制品.常用的玻璃器皿有下面幾種.

　　(1)液體儲存瓶:用于儲存各種配制好的培養(yǎng)液、血清等液體,常以500ml、250ml、100ml生理鹽水瓶或血漿瓶代替.

　　(2)培養(yǎng)瓶:根據(jù)培養(yǎng)細胞種類要求不同培養(yǎng)瓶的形態(tài)各異,用于細胞傳代培養(yǎng)的細胞要求瓶壁厚簿均勻,便于細胞貼壁生長和觀察,瓶口要大小一致,口徑一般不小于1cm,允許吸管伸入瓶內(nèi)任何部位,規(guī)格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等幾種.用于外周血培養(yǎng)的常用10ml普通圓瓶.兩種培養(yǎng)瓶均要求選用玻璃制成.

　　(3)培養(yǎng)皿:用于開放式培養(yǎng)及其它用途.分直徑30mm、60mm、120mm等幾種.

　　(4)吸管:常用的有長吸管和短吸管兩類,長吸管也稱刻度吸管.其改良后管上部有球型刻度稱改良吸管,刻度吸管用于移動液體.常用1ml和10ml兩種.短吸管也叫滴管,分彎頭和直頭兩種.

　　(5)離心管:離心管是細胞培養(yǎng)中使用zui廣泛的器皿,根據(jù)用途不同形態(tài)各樣,常用于細胞培養(yǎng)的離心管有大腹式尖底離心管和普通尖底離心管兩類.前者分別為50ml、30ml、15ml;后者則多為10ml和5ml.

　　(6)其它:如三角燒瓶、燒杯、量筒、漏斗、注射器等.

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